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分享|理化實驗室常見注意事項

2021-12-31 作者: 瀏覽數:1302

  上班前

  1. 開門(men)注意通風(feng),檢查門(men)窗、空(kong)調設備(bei)、其它電器設備(bei)等是(shi)否正(zheng)常。

  2. 用水注意(yi)先把(ba)水龍頭的水擰(ning)開一段時間(jian)。

  3. 看看今天(tian)是否要用烘箱,確定即(ji)打開,注(zhu)意升(sheng)溫情況。

  上班過程

  1. 烘箱、電(dian)爐、馬弗爐、高壓鍋等不用(yong)時(shi)需及時(shi)關掉,無(wu)人(ren)看守時(shi)也必(bi)須關掉。

  2. 經常收拾(shi)桌面,清理用過的用具、玻璃儀(yi)器等。

  3. 經常(chang)檢查試(shi)劑配制(zhi)使用情況,是否有過期試(shi)劑、標準液等。

  4. 對于架上試劑瓶經常拭擦以保持干凈無灰塵(chen)。

  5. 原始(shi)記錄必須(xu)是實(shi)驗(yan)過(guo)程中(zhong)的實(shi)際數據,不能隨意涂(tu)改(gai),如(ru)果對結(jie)果有懷疑,也(ye)不能劃去或撕(si)毀,而在備注注明情況(kuang),重新做(zuo)試驗(yan)并記錄,直(zhi)到結(jie)果滿意。

  6. 原始記錄(lu)是應(ying)統一表(biao)格,歸檔保存,按每月整理(li)(li)收藏,(不常(chang)有的原始記錄(lu)酌情處理(li)(li))。

  7. 儀器(qi)用(yong)具分類擺放(fang),用(yong)過的儀器(qi)用(yong)具即(ji)時清洗(xi)(xi)干凈,自然(ran)晾(liang)干(或烘干),置(zhi)于(yu)指定位置(zhi)存放(fang),以備后用(yong)(注意(yi)盡量(liang)不要用(yong)前匆匆忙忙清洗(xi)(xi)儀器(qi)用(yong)具)。

  下班

  1. 確認未(wei)完成(cheng)試驗樣品(pin)及儀器的安(an)全性。

  2. 關閉所(suo)有電源,培養箱、冰箱除(chu)外。

  3. 確認(ren)關好水龍頭。

  4. 確認關好所有門窗。

  標準(zhun)液標定注意(yi)事項

  1. 各種基準物質烘干的溫度要求并(bing)不(bu)一樣。

  2. 烘干過(guo)程,稱(cheng)量瓶(ping)的蓋(gai)子應置(zhi)于稱(cheng)量瓶(ping)上(shang),傾斜一定角度使半蓋(gai)狀態,不要把蓋(gai)另置(zhi)于烘箱(xiang)板上(shang),這是為了防(fang)止有異(yi)物從烘箱(xiang)頂部(bu)跌(die)落到樣(yang)品中,也防(fang)止把烘箱(xiang)板上(shang)的異(yi)物帶(dai)入樣(yang)品中。

  3. 樣品應(ying)置于溫度計(ji)探頭附近。

  4. 烘好后,把(ba)干燥(zao)器移(yi)到烘箱邊(bian),用夾子等(deng)圈住稱(cheng)量瓶,以(yi)最短的時(shi)(shi)間把(ba)稱(cheng)量瓶移(yi)入干燥(zao)器中,蓋好干燥(zao)器,半個小時(shi)(shi)內,小心移(yi)開干燥(zao)器蓋少許(xu),以(yi)放出部分熱(re)空氣(qi)。

  5. 樣品(pin)冷卻后則(ze)要(yao)稱(cheng)量,不(bu)能待太長時間。

  6. 稱(cheng)量時始終一個原則(ze),不(bu)要讓(rang)稱(cheng)量瓶(ping)吸(xi)附到水氣、污跡(ji)或其(qi)它異物,所以(yi)直(zhi)接(jie)用(yong)手(shou)接(jie)觸稱(cheng)量瓶(ping)、用(yong)藥匙取樣品(pin)、開(kai)著天(tian)平門稱(cheng)量甚至呼吸(xi)氣吹到稱(cheng)量瓶(ping)都是(shi)不(bu)正(zheng)確的操作。

  7. 正確的稱(cheng)(cheng)量(liang)操作應是減(jian)量(liang)法(fa)稱(cheng)(cheng)量(liang),為什(shen)么(me)呢,因為減(jian)量(liang)法(fa)稱(cheng)(cheng)量(liang),稱(cheng)(cheng)的是烘好的樣(yang)品(pin),確保樣(yang)品(pin)大部分時間(jian)在天平(ping)的干(gan)燥環境(jing)中。

  8. 如果(guo)增量法稱量,則要確保器(qi)皿(min)干燥且外表也須干凈(jing),由(you)于是在天(tian)平(ping)(ping)中操作,所以(yi)不(bu)能(neng)碰到器(qi)皿(min)以(yi)引起天(tian)平(ping)(ping)讀數異常,所以(yi)操作起來會麻煩很多。

  9. 稱量(liang)過程中,只能用(yong)稱量(liang)瓶蓋(gai)輕(qing)輕(qing)敲(qiao)打稱量(liang)瓶邊緣,使(shi)藥(yao)品均勻落到待測器皿中,敲(qiao)藥(yao)時間盡量(liang)的(de)短,這要求(qiu)較熟練(lian)的(de)操作。

  10. 盡可能的(de)多稱幾個樣(yang)品,結(jie)果取最可能的(de)數(shu)值,舍(she)棄較大和較小的(de)數(shu)值。

  關(guan)鍵:烘干、冷卻、稱量(liang)

  還原糖測定注(zhu)意事(shi)項(xiang)

  1. 堿性(xing)酒石酸甲、乙液(ye)(ye)與還原糖反應(ying)是(shi)定(ding)(ding)量關系,它們的多少(shao)直接(jie)影響測定(ding)(ding)結果的多少(shao),從而影響檢(jian)測數據,所以堿性(xing)酒石酸甲、乙液(ye)(ye)必須(xu)精確(que)吸取(qu)(qu),保證每次(ci)取(qu)(qu)樣(yang)量一致。

  影響堿性酒石酸甲、乙(yi)液(ye)吸取誤差(cha)的因素:

  (1)堿性酒石酸甲、乙液(ye)在吸管中刻(ke)度液(ye)面的(de)位置要保持一致。

  (2)吸(xi)管外壁殘留的液體多少會造成(cheng)堿性酒(jiu)石(shi)酸(suan)甲(jia)、乙液

  取(qu)樣量的(de)(de)誤差,所以要習慣性(xing)(xing)的(de)(de)對(dui)吸管外(wai)壁的(de)(de)堿性(xing)(xing)酒石(shi)酸(suan)甲、乙液(ye)進(jin)行相同處理,保(bao)證(zheng)每次(ci)外(wai)壁殘留液(ye)相對(dui)一致(zhi),從而(er)減少液(ye)體(ti)取(qu)樣量的(de)(de)誤差。

  (3)堿性酒石酸(suan)甲、乙(yi)液放(fang)(fang)入三角瓶的速度保持一致(zhi)(不可吹),放(fang)(fang)完后要觀察(cha)其殘(can)留在吸管中(zhong)有(you)多少,要保證每次殘(can)留一致(zhi)。

  (4)堿性(xing)酒(jiu)(jiu)石酸(suan)(suan)甲(jia)、乙液的不(bu)(bu)是很明顯(xian)的沉(chen)淀(或濃度(du)變化)也會(hui)對測定造(zao)成波動,取堿性(xing)酒(jiu)(jiu)石酸(suan)(suan)甲(jia)液的器(qi)具(ju)切記不(bu)(bu)要與堿性(xing)物質(zhi)接(jie)觸(同時也要注意(yi)防止帶入堿性(xing)物質(zhi)于甲(jia)液中),以(yi)避免甲(jia)液產生沉(chen)淀,盛甲(jia)液的容器(qi)時間(jian)長了(le),內壁上也會(hui)殘留固體(硫酸(suan)(suan)銅(tong)),這些固體顆粒也會(hui)造(zao)成檢測誤差。

  2. 滴定速度要保持(chi)均衡一致,趁熱以(yi)每2秒一滴的(de)(de)速度滴定為(wei)好(速度不要受滴定時間的(de)(de)長(chang)短(duan)而改變)。

  3. 試(shi)(shi)樣溶液滴(di)定(ding)(ding)時要進行預測,正式測定(ding)(ding)時從(cong)滴(di)定(ding)(ding)管滴(di)加(jia)比預測體積(ji)少1mL的試(shi)(shi)樣溶液至錐(zhui)形(xing)瓶中,控制在2min中內(nei)加(jia)熱至沸(fei),保持沸(fei)騰以1滴(di)/2s的速(su)度滴(di)定(ding)(ding)至終(zhong)點。

  4. 電(dian)爐的溫(wen)度對檢測結果也(ye)有(you)影響,所(suo)以要保(bao)(bao)證(zheng)電(dian)爐充分預熱,同時三角瓶在電(dian)爐上的放置(zhi)位(wei)置(zhi)要保(bao)(bao)持一致(zhi)。

  5. 測定(ding)時(shi)(shi)液體沸騰(teng)后的(de)開始滴定(ding)的(de)時(shi)(shi)間也要保持一致2min內,一般等(deng)液體充分(fen)沸騰(teng)后開始滴定(ding)。

  6. 滴定終點的判(pan)斷也要保(bao)持一致。等液體藍色剛好褪去為為滴定終點。

  7. 糖液(ye)稀(xi)釋及取樣(yang)也要注(zhu)意(yi)精確,注(zhu)意(yi)吸管正確使用方法。

  8. 折光(guang)糖度(du)精心檢測,依此數據輔導還(huan)原糖的(de)檢測。

  9. 注意輸液膠管漏液、變形(xing),滴定管尖端(duan)氣泡等(deng)對檢測數值(zhi)的影(ying)響。

  10. 三角瓶使用后清(qing)(qing)洗(xi)干凈。有時(shi)無(wu)法準確找到(dao)滴定(ding)終(zhong)點就是由于三角瓶未(wei)清(qing)(qing)洗(xi)干凈引起(qi)的。

  關鍵(jian):吸取堿(jian)性酒石酸、甲乙液(ye)沸(fei)騰并維持沸(fei)騰2mins、整個滴定(ding)過程須控制在2mins內完成。

  凱氏定氮蛋(dan)白質(zhi)測定注意事項(xiang)

  1. 原則上樣(yang)品越少,越容易消(xiao)化,但樣(yang)品越少,計量(liang)的(de)誤差可能性也越大(da),所以控制到蛋(dan)白質含量(liang)為0.10g左(zuo)右(you),加(jia)入0.4g硫酸(suan)銅(tong)、6g硫酸(suan)鉀及(ji)20mL濃硫酸(suan)應(ying)是比較合理的(de)消(xiao)化方(fang)法。

  2. 變(bian)(bian)色(se)(se)時(shi)因為(wei)是緩慢變(bian)(bian)色(se)(se),所以(yi)可以(yi)兩種方法計時(shi),一(yi)是完全(quan)變(bian)(bian)色(se)(se)后(hou)半小(xiao)時(shi)即停止消化(hua),二是剛變(bian)(bian)色(se)(se)后(hou)一(yi)個小(xiao)時(shi)停止消化(hua)。

  3. 消化液(ye)完(wan)全冷卻后才能加水、轉移(yi)、定容,這三個步(bu)驟都會導致發熱,所以必須(xu)確保水溶(rong)液(ye)最后在定容到刻度時冷卻到室(shi)溫,當然要多(duo)次洗滌(di)凱(kai)(kai)氏燒瓶(ping)(即凱(kai)(kai)氏定氮(dan)瓶(ping))以確保轉移(yi)完(wan)全。

  4. 消(xiao)化(hua)液(ye)(ye)最好不要放置過(guo)(guo)液(ye)(ye),需要過(guo)(guo)夜測定(ding)(ding)時(shi),請先轉移定(ding)(ding)容(rong)好消(xiao)化(hua)液(ye)(ye)。定(ding)(ding)容(rong)好的消(xiao)化(hua)液(ye)(ye)也(ye)不能放置時(shi)間太久(jiu)(如幾天)才(cai)進行(xing)蒸餾滴(di)定(ding)(ding)。

  5. 蒸餾時(shi),加樣液過(guo)程(cheng)可以從容(rong)操作,但是(shi)加堿后,必須緊密有(you)(you)序,堿的流入過(guo)程(cheng)應是(shi)充滿整個漏(lou)(lou)斗口(kou)(kou)的,在堿還沒(mei)有(you)(you)放完(wan)時(shi)就應準(zhun)備好(hao)加水以封住漏(lou)(lou)斗口(kou)(kou),確保蒸發器中(zhong)已有(you)(you)氨從漏(lou)(lou)斗口(kou)(kou)泄漏(lou)(lou),而導致結果偏低。

  6. 加入的(de)氫氧(yang)化(hua)鈉溶液(ye)(ye)除(chu)與硫酸(suan)銨(an)作用外,還與消化(hua)液(ye)(ye)中的(de)硫酸(suan)和硫酸(suan)銅作用,若加入的(de)氫氧(yang)化(hua)鈉不夠,則溶液(ye)(ye)呈藍(lan)色(se),不生成褐色(se)的(de)氫氧(yang)化(hua)銅沉淀。所(suo)以(yi)(yi),加入的(de)氫氧(yang)化(hua)鈉必須過量,并且動作還要迅速(su),以(yi)(yi)防止氨的(de)流失。

  7. 停止蒸餾(liu)時(shi),由于反(fan)應(ying)室外層的壓力(li)突然降(jiang)低,可使液(ye)體倒吸入(ru)反(fan)應(ying)室外層,所以(yi),操作時(shi),應(ying)先將冷凝管下(xia)端提高(gao)液(ye)面(mian)并清洗管口,再蒸一(yi)分鐘后關掉熱源。蒸餾(liu)是否完全,可用精密pH試紙測冷凝管口的冷凝液(ye)來測定,中性則說(shuo)明已(yi)蒸餾(liu)完全。

  關鍵:樣品稱量入凱(kai)氏燒瓶、加堿(jian)

  附:做蛋白質試驗化驗室的常見問題:

  1. 沒有用長條紙(zhi)稱量(liang)。

  2. 不知道樣(yang)品精確度是(shi)多少,用何種(zhong)天平稱量;

  3. 直接從原試劑瓶中取(qu)藥稱量。

  4. 凱氏燒瓶(ping)角度不對(dui)(應45-60度之間(jian))。

  5. 不(bu)固定凱氏(shi)燒瓶就進行消化,就是隨便掛上去,太危險。

  6. 消化溫度不知如何控制,什么時候(hou)該小(xiao)(xiao)火,小(xiao)(xiao)到多(duo)少(shao),什么時候(hou)該大(da)火擔心(xin)不加石棉網會使凱氏(shi)燒瓶破裂。

  7. 不知如何把握凱氏燒瓶以振搖消化(hua)液,也(ye)沒有(you)準備厚手套。

  8. 不知(zhi)道過夜保存的應是消(xiao)化液而(er)不是定容(rong)(rong)液(消(xiao)化液定容(rong)(rong)后應及時蒸餾)。

  9. 第二天發現定(ding)容(rong)液(ye)液(ye)面低于刻度(du)時又加水到(dao)刻度(du)。

  10. 標定基準物(wu)沒有烘到要(yao)求(qiu)溫度。

  11. 以(yi)為蒸(zheng)餾要在通(tong)風櫥中進行。

  12. 不知道定(ding)氮(dan)儀(yi)如(ru)何(he)裝,如(ru)何(he)清洗(xi),總是拆下來(lai)人工清洗(xi),結果洗(xi)不干(gan)凈(jing)又打破了不少(shao)零件。

  13. 不知如何正常使(shi)用定(ding)氮儀(yi),對后(hou)面的操作如清(qing)洗、加堿注意事(shi)項、蒸餾火力控制等無所適從。

  14. 對結果(guo)沒有考慮到要(yao)計算干(gan)基(ji)還是濕基(ji)。

  15. 吸(xi)管(guan)吸(xi)樣(yang)品(pin)液后沒有用濾紙把沾在吸(xi)管(guan)外(wai)壁的樣(yang)液吸(xi)干。

  16. 用吸管去(qu)吸標(biao)準(zhun)液加到滴定管中(zhong)去(qu)。

  17. 沒有取下滴定管自然(ran)垂直查看刻(ke)度。

  18. 用2000mL的大(da)(da)燒瓶(ping)(ping)作(zuo)(zuo)蒸發(fa)器(qi)而(er)不作(zuo)(zuo)任何固定,危險重重,對(dui)用大(da)(da)三角瓶(ping)(ping)作(zuo)(zuo)為蒸發(fa)器(qi)覺(jue)得不可思議。

  19. 對(dui)原(yuan)始記錄管理不到位。


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