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微生物檢測能力驗證注意事項有哪些?

2022-06-01 作者: 瀏覽數:1055

  實(shi)(shi)驗(yan)(yan)(yan)室能(neng)力驗(yan)(yan)(yan)證和室間(jian)比(bi)對(dui)活動是判(pan)定(ding)實(shi)(shi)驗(yan)(yan)(yan)室檢測(ce)能(neng)力的(de)(de)重(zhong)要手段(duan)之(zhi)一,不但可以(yi)提高實(shi)(shi)驗(yan)(yan)(yan)室的(de)(de)檢測(ce)能(neng)力和技術(shu)水平,發現實(shi)(shi)驗(yan)(yan)(yan)室操作技術(shu)和質量管理上存在的(de)(de)問題,還能(neng)增加客戶以(yi)及相關方對(dui)實(shi)(shi)驗(yan)(yan)(yan)室的(de)(de)信任。

  今天小編和大家(jia)一起來看看微(wei)生物能力驗(yan)證注意事項(xiang)有(you)哪些?

  01、能力驗證樣(yang)品接收(shou)及準備

  1、操作前(qian)仔細閱(yue)讀參考指導書,關(guan)鍵是小的備注(zhu)(zhu)要(yao)注(zhu)(zhu)意,很多特(te)殊(shu)情況的處理大都在備注(zhu)(zhu)里(li)。

  2、樣(yang)(yang)品(pin)(pin)接收前的(de)(de)檢查很重要,首先對(dui)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)完整性進(jin)行檢查,對(dui)信息的(de)(de)閱讀(du)要全面,如果發(fa)(fa)現樣(yang)(yang)品(pin)(pin)有問題(ti)及時(shi)(shi)溝通,這樣(yang)(yang)要比做(zuo)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)時(shi)(shi)候在發(fa)(fa)現來的(de)(de)要及時(shi)(shi),能(neng)節省不少(shao)的(de)(de)時(shi)(shi)間;

  3、作(zuo)業指導(dao)書的(de)閱(yue)讀要(yao)到(dao)位,很多能力驗(yan)證樣品(pin)(pin)寄到(dao)后(hou)要(yao)跟(gen)一(yi)份作(zuo)業指導(dao)書,作(zuo)業指導(dao)書中往(wang)往(wang)會對本次能力驗(yan)證的(de)樣品(pin)(pin)、成分、尺寸、選擇方法(fa)、樣品(pin)(pin)的(de)結果記錄、包括修約或樣品(pin)(pin)的(de)粘貼、樣品(pin)(pin)寄發(fa)的(de)注意事(shi)項等有(you)(you)(you)明確的(de)規定,熟讀這(zhe)些對試(shi)驗(yan)準備有(you)(you)(you)很好的(de)作(zuo)用。比如有(you)(you)(you)的(de)會要(yao)求將試(shi)驗(yan)后(hou)樣品(pin)(pin)一(yi)塊寄發(fa)組(zu)織單位,有(you)(you)(you)的(de)實驗(yan)室(shi)如果不仔細閱(yue)讀的(de)話很容易將測(ce)試(shi)后(hou)樣品(pin)(pin)立即(ji)處理掉,如果寄樣時再看(kan)見可就完了。

  4、測試前(qian)(qian)的準(zhun)備工作(zuo)一(yi)定要做好(hao),包括設備的校準(zhun)、試運行(xing)等,有條件(jian)的情況下可以在正(zheng)式測試前(qian)(qian)選擇一(yi)塊相仿的樣品進行(xing)一(yi)下預測試,這樣會將測試過(guo)程中(zhong)的問題提(ti)前(qian)(qian)發現提(ti)前(qian)(qian)解決。對(dui)正(zheng)式測試的操作(zuo)有幫助。

  02、能(neng)力(li)驗(yan)證(zheng)樣品預(yu)處理

  1、樣品(pin)測(ce)試(shi)過程中的(de)判斷(duan)能(neng)力很重(zhong)要,有時候我(wo)們(men)在測(ce)試(shi)中往往會自以(yi)為是(shi),為了保證測(ce)試(shi)過程中的(de)準確操(cao)(cao)作(zuo)(zuo)最(zui)好是(shi)找一個經(jing)驗豐富的(de)作(zuo)(zuo)督察,發現問(wen)題(ti)及時解決,如果(guo)等操(cao)(cao)作(zuo)(zuo)完畢再發現問(wen)題(ti)的(de)話可能(neng)會因為樣品(pin)的(de)消耗而(er)無(wu)法驗證結果(guo);

  2、定量項目(mu),西(xi)林瓶內樣品(pin)不可分(fen)割,應全部用于檢測。一(yi)般參考書指導的是加40mL稀釋液制成40mL樣品(pin)。

  3、定(ding)量項目樣品(pin)稀(xi)(xi)釋(shi)。指導書標明了(le)稀(xi)(xi)釋(shi)范圍的(de),在稀(xi)(xi)釋(shi)范圍左右各加1個稀(xi)(xi)釋(shi)度進行;書上沒有(you)稀(xi)(xi)釋(shi)范圍的(de),多做稀(xi)(xi)釋(shi)倍數(shu),選(xuan)擇合適(shi)的(de)稀(xi)(xi)釋(shi)倍數(shu)計數(shu)(一般可稀(xi)(xi)釋(shi)至10-8)。

  4、定(ding)量項(xiang)目(mu),除了要多做稀(xi)釋倍(bei)數(shu)外,同時(shi)同一稀(xi)釋度(du)要多倒(dao)幾(ji)皿(min),從(cong)原理上來講,檢測過程屬于隨機抽樣檢查,平板越(yue)多,數(shu)據越(yue)接近(jin)真值。考慮性(xing)價(jia)比,又不可能一直(zhi)瘋狂一個稀(xi)釋度(du)很多平板,所以能力(li)驗證時(shi)候多倒(dao)幾(ji)皿(min),求好結果(guo)。

  5、定性(xing)項目(mu)有一(yi)些重要步(bu)驟:

  a、增菌及分(fen)(fen)(fen)離(li)步驟尤其(qi)重(zhong)要。選擇(ze)合適的增菌液和分(fen)(fen)(fen)離(li)用培(pei)養(yang)基對(dui)目標菌的檢(jian)出(chu)非(fei)常關(guan)鍵,選擇(ze)兩種以上的增菌液和分(fen)(fen)(fen)離(li)用培(pei)養(yang)基對(dui)菌株(zhu)作(zuo)直接分(fen)(fen)(fen)離(li)和增菌后分(fen)(fen)(fen)離(li)。

  b、劃線分(fen)離(li)十分(fen)重要,要把增菌(jun)液中的目(mu)(mu)標菌(jun)盡(jin)量(liang)多的表(biao)達出來(lai),要分(fen)出單個菌(jun)落并盡(jin)可能多挑取(qu)可疑(yi)菌(jun)落,確保分(fen)離(li)到目(mu)(mu)標菌(jun)。

  c、生化(hua)試驗和血清(qing)學試驗以營(ying)養瓊(qiong)脂平板上(shang)的純(chun)培養細(xi)菌為好。

  03、實驗(yan)過程一定要(yao)做(zuo)陰陽對照

  陽性對照(zhao),是(shi)(shi)在(zai)(zai)試驗(yan)中(zhong)(zhong),檢驗(yan)培養(yang)基(ji)和(he)培養(yang)條件是(shi)(shi)否適合,如果(guo)(guo)在(zai)(zai)實驗(yan)中(zhong)(zhong),陽性實驗(yan)沒有生長的(de)話(hua),那這個實驗(yan)是(shi)(shi)失敗的(de)。陰性對照(zhao)主要是(shi)(shi)檢測培養(yang)基(ji)是(shi)(shi)否污染(ran),在(zai)(zai)沒有加(jia)入任(ren)何東西培養(yang)時,培養(yang)基(ji)培養(yang)后還(huan)是(shi)(shi)會顯(xian)示陽性結果(guo)(guo),這就說明培養(yang)基(ji)滅(mie)菌不(bu)徹(che)底,染(ran)菌了(le),這樣也會影響實驗(yan)結果(guo)(guo)的(de)。

  04、培(pei)養(yang)基(ji)方面(mian)需要(yao)注意地方

  1、培養基(ji)配制充分混勻后再滅菌(jun)

  正確做法(fa)是用一部分(fen)水(shui)(shui)攪拌(ban)均(jun)勻后,再加(jia)入剩余水(shui)(shui)量,混勻后滅菌或分(fen)裝(zhuang)。

  一定(ding)要(yao)用震蕩(dang)器充(chong)分混(hun)勻(yun)水化液(ye),作為檢(jian)測原液(ye),普(pu)通(tong)手搖混(hun)勻(yun)與經震蕩(dang)器混(hun)勻(yun)的樣品(pin)液(ye),計(ji)數結(jie)果相差較大。混(hun)勻(yun)后的樣品(pin)嚴(yan)格(ge)按照指導書規定(ding)的時間(jian)進行檢(jian)驗。

  2、混菌(jun)法(fa)倒皿要充分混勻(yun)

  培養基倒完要(yao)左5圈右5圈(混(hun)勻速度一定(ding)要(yao)慢,目的(de)是——避免培養基波動到二皿接觸的(de)縫隙部分造成后續污染),找較(jiao)水平位置冷卻(que)凝固。

  3、培養基要不要覆(fu)蓋問題(ti)

  覆蓋的目(mu)的是為了阻止活菌在培(pei)養基表(biao)層通過鞭毛移動,造(zao)成片狀生長,無法(fa)計數這一不利(li)現象(xiang)的發生。這里可以(yi)發揮主觀能動性-對于(yu)不運動的菌,可以(yi)不覆蓋,對于(yu)運動的菌覆蓋。

  總結一下圖片


  A、長(chang)期(qi)檢(jian)測(ce)(ce)同一種(zhong)樣品,不覆(fu)蓋(gai)并無蔓延現(xian)象,不覆(fu)蓋(gai);長(chang)期(qi)檢(jian)測(ce)(ce)蔓延選(xuan)擇了覆(fu)蓋(gai),一直覆(fu)蓋(gai)。

  B、未知樣(yang)品,進行覆(fu)(fu)(fu)蓋和不覆(fu)(fu)(fu)蓋的比對實驗(yan),然后(hou)決定以(yi)后(hou)同樣(yang)的樣(yang)品是否需要(yao)覆(fu)(fu)(fu)蓋。養成(cheng)經驗(yan)。

  C、能力驗證實驗,覆蓋(gai)和不覆蓋(gai)的都做,不要(yao)吝惜那么(me)一點(dian)點(dian)培養基或耗(hao)材,畢(bi)竟能力驗證實驗做的漂亮才(cai)是實驗室(是室而不是人!)能力的綜合(he)體(ti)現。

  4、 實驗培養過程勤觀察(cha)

  微生(sheng)物培(pei)(pei)養過程(cheng)一(yi)般需要幾(ji)小時到幾(ji)十小時,要利用這(zhe)段時間觀(guan)察培(pei)(pei)養箱及菌生(sheng)長(chang)情(qing)況,比如溫度(du)是否穩定,培(pei)(pei)養室內(nei)濕度(du)如何等(deng)等(deng),多思多看(kan),準備(bei)預案。方有可(ke)能得到與盲樣一(yi)致(zhi)的(de)實(shi)驗結果。

  原(yuan)始記錄應(ying)有條(tiao)理、思路(lu)清晰,完整準確地記錄菌株鑒(jian)定(ding)檢(jian)驗的(de)全過程,原(yuan)始記錄要包含檢(jian)測時間、檢(jian)測現象、檢(jian)測結果三個要素(su),方(fang)便(bian)檢(jian)測出現問(wen)題的(de)溯源。

  05結果判斷

  結果的(de)(de)判(pan)定(ding)一般根據設備操(cao)(cao)作,但是對于(yu)人(ren)為(wei)操(cao)(cao)作如評級、手工(gong)操(cao)(cao)作等結果可能會因為(wei)人(ren)員的(de)(de)差別而會有不同的(de)(de)偏差,這樣(yang)在(zai)判(pan)定(ding)時最好是找有經(jing)驗的(de)(de)部門負責人(ren)或質量專家一塊(kuai)定(ding)奪,這樣(yang)的(de)(de)話會減少很多(duo)不必要的(de)(de)錯誤。


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