2015年10月18日第四屆全國激(ji)光共聚焦顯(xian)微技術理論(lun)與應(ying)用學術交流(liu)研討會圓滿閉幕(mu)。

　　在(zai)14日下午的會議中，有一個特邀報告格外地引起了筆(bi)者(zhe)的注(zhu)意(yi)，來自西北農林科(ke)技(ji)大學(xue)動物(wu)醫學(xue)院的趙善廷教授提到他曾與高壓冷(leng)凍固(gu)定技(ji)術(shu)的發明者(zhe)瑞士科(ke)學(xue)家Studer博士合作(zuo)，將(jiang)該技(ji)術(shu)與器官型腦片(pian)培養(yang)技(ji)術(shu)(organotypic slice culture)相(xiang)結(jie)合，成功地研(yan)究(jiu)了與學(xue)習和記憶密切有關的長時程效應(long-term potentiation, LTP)對突觸的影(ying)響。

西北農林科技大學動物醫學院的趙善廷教授

　　據(ju)了解，以往的常規(gui)電鏡(jing)技術需要先用(yong)甲醛、戊(wu)二醛等化(hua)學(xue)(xue)試(shi)劑對(dui)樣(yang)品進行化(hua)學(xue)(xue)固定(ding)，但這種(zhong)固定(ding)方(fang)法有三(san)個缺(que)點(dian)包括(kuo)：

　　一、無(wu)法撲捉短(duan)暫生理過(guo)(guo)程的(de)形(xing)態變(bian)(bian)化(hua)和(he)(he)特征，如神(shen)(shen)經(jing)(jing)元突觸小(xiao)泡內神(shen)(shen)經(jing)(jing)遞(di)質(zhi)的(de)釋放；二、脫水過(guo)(guo)程用酒(jiu)精等有(you)機(ji)溶劑(ji)會造(zao)成(cheng)細胞和(he)(he)組(zu)織皺縮，使其(qi)形(xing)態和(he)(he)大小(xiao)發生改變(bian)(bian)；三、化(hua)學固定劑(ji)特別是戊二醛可引起蛋白(bai)質(zhi)變(bian)(bian)性，使其(qi)與相應抗(kang)體結合能力下(xia)降甚至(zhi)喪(sang)失，導致電鏡免疫組(zu)化(hua)染色(se)失敗。

　　為克服化學固定的這些缺(que)點(dian)，上世(shi)紀九十年代末，瑞士科(ke)學家Studer博士發(fa)明了一(yi)種新(xin)的物理性電鏡固定技術(shu)，即高壓(ya)冷凍電鏡固定技術(shu)，該(gai)技術(shu)可以在(zai)不(bu)使用任何化學固定劑(ji)的條(tiao)件下五十毫秒以內將組織和細胞完全(quan)固定。

　　雖然高壓(ya)冷凍技術克服了(le)化學固定(ding)的(de)三大缺點，但它本身也有(you)一個不足之處(chu)：固定(ding)的(de)樣品非常小，直徑不能超(chao)過(guo)1mm，厚度(du)不能超(chao)過(guo)μm，從(cong)而限(xian)制了(le)它在(zai)神經生物學研究(jiu)中(zhong)的(de)應用。

　　為(wei)了克服高(gao)壓(ya)冷凍固定技(ji)(ji)術(shu)的(de)缺點，將(jiang)其應用到神經生物學研(yan)究中(zhong)，2002年(nian)，該(gai)技(ji)(ji)術(shu)發明者(zhe)(zhe)Studer博(bo)(bo)士(shi)與(yu)當時正在德國(guo)(guo)弗萊堡(bao)大學醫學院做博(bo)(bo)士(shi)后的(de)趙善廷博(bo)(bo)士(shi)合作，將(jiang)器官型腦(nao)片(pian)培養技(ji)(ji)術(shu)和高(gao)壓(ya)冷凍固定技(ji)(ji)術(shu)相結(jie)合固定神經纖維，歷時五(wu)年(nian)的(de)不斷摸索，到2007年(nian)兩種技(ji)(ji)術(shu)終(zhong)于完美地結(jie)合在一起。趙教(jiao)授在接受(shou)本網記(ji)者(zhe)(zhe)采訪時表示，希望能夠與(yu)國(guo)(guo)內(nei)相關課(ke)題組(zu)合作，為(wei)這(zhe)種樣品(pin)制(zhi)備方法尋找更多的(de)應用領域。

撰稿：史秀明