化學實驗室檢測方法的驗證與確認的參數
2018-07-26
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檢測方法的驗證與確認的參(can)數
化(hua)(hua)學(xue)檢測(ce)的(de)(de)(de)(de)(de)對(dui)(dui)象即分(fen)析的(de)(de)(de)(de)(de)目標(biao)化(hua)(hua)合(he)物(wu)按照性(xing)質(zhi)(zhi)(zhi)可以分(fen)為不得檢出(chu)的(de)(de)(de)(de)(de)物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi) (禁(jin)用物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)) 、限制(zhi)使(shi)用的(de)(de)(de)(de)(de)物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi) (已制(zhi)定最(zui)高允許殘(can)留限量(liang)物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)) 和無限制(zhi)使(shi)用物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)這三類(lei)。因此, 在對(dui)(dui)化(hua)(hua)學(xue)檢測(ce)方(fang)法(fa)(fa)進(jin)(jin)行驗(yan)證和確(que)(que)(que)(que)認(ren)(ren)過(guo)程中制(zhi)訂相(xiang)關技(ji)術指標(biao)的(de)(de)(de)(de)(de)試驗(yan)方(fang)案及結果評價時, 也應充分(fen)考慮(lv)這三類(lei)物(wu)質(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)(de)不同(tong)特性(xing)來控制(zhi)執行。國(guo)際部分(fen)技(ji)術組織針對(dui)(dui)化(hua)(hua)學(xue)檢測(ce)實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)驗(yan)證與確(que)(que)(que)(que)認(ren)(ren)都提出(chu)了相(xiang)關的(de)(de)(de)(de)(de)技(ji)術要(yao)求, GB/T27404-2008標(biao)準等文件也給出(chu)方(fang)法(fa)(fa)確(que)(que)(que)(que)認(ren)(ren)與驗(yan)證可參(can)考的(de)(de)(de)(de)(de)技(ji)術參(can)數(shu)。從方(fang)法(fa)(fa)驗(yan)證與確(que)(que)(que)(que)認(ren)(ren)參(can)數(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)科(ke)學(xue)性(xing)和有效性(xing)論(lun)證角度(du)看, 化(hua)(hua)學(xue)檢測(ce)方(fang)法(fa)(fa)驗(yan)證的(de)(de)(de)(de)(de)技(ji)術指標(biao)可分(fen)為方(fang)法(fa)(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)校(xiao)準曲線(xian)、回收率、精密度(du)、準確(que)(que)(que)(que)度(du) (正(zheng)確(que)(que)(que)(que)度(du)) 試驗(yan)。而(er)非(fei)標(biao)方(fang)法(fa)(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)確(que)(que)(que)(que)認(ren)(ren)技(ji)術指標(biao)除了方(fang)法(fa)(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)校(xiao)準曲線(xian)、回收率、精密度(du)、準確(que)(que)(que)(que)度(du) (正(zheng)確(que)(que)(que)(que)度(du)) 試驗(yan)以外, 還需要(yao)進(jin)(jin)行方(fang)法(fa)(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)特異性(xing)、耐用性(xing)和測(ce)量(liang)不確(que)(que)(que)(que)定度(du)評估等確(que)(que)(que)(que)認(ren)(ren)。
1 方法的校準曲線
實驗室認可的實驗室應確定檢測方法校準曲線的數學方程以及校準曲線的工作范圍, 濃度范圍盡可能覆蓋一個數量級, 至少作5個點 (不包括空白) 。對于篩選方法 (即指定性方法或半定量方法) , 方法線性回歸方程的相關系數不應低于0.98, 對于確證方法 (即能準確定量的方法) , 方法線性回歸方程的相關系數不應低于0.99。測試溶液中被測組分濃度必須在校準曲線的線性范圍內。
2 方法(fa)的(de)回收率
方(fang)(fang)法(fa)的(de)(de)(de)回(hui)(hui)(hui)(hui)收(shou)率(lv)代表了(le)測(ce)試(shi)(shi)人(ren)員操(cao)作檢測(ce)過程所(suo)獲得測(ce)試(shi)(shi)結(jie)(jie)果的(de)(de)(de)準確(que)性。考(kao)慮到被測(ce)物的(de)(de)(de)濃(nong)度水(shui)(shui)平(ping)會影(ying)響到回(hui)(hui)(hui)(hui)收(shou)率(lv)試(shi)(shi)驗(yan)(yan)結(jie)(jie)果的(de)(de)(de)高(gao)低(di)(di), 因此, 在進(jin)(jin)行(xing)(xing)方(fang)(fang)法(fa)的(de)(de)(de)回(hui)(hui)(hui)(hui)收(shou)率(lv)驗(yan)(yan)證試(shi)(shi)驗(yan)(yan)時(shi), 對于禁(jin)用物質, 回(hui)(hui)(hui)(hui)收(shou)率(lv)應(ying)在方(fang)(fang)法(fa)測(ce)定(ding)(ding)低(di)(di)限(xian)(xian)(xian) (LOD) 、兩(liang)倍方(fang)(fang)法(fa)測(ce)定(ding)(ding)低(di)(di)限(xian)(xian)(xian)和十(shi)倍方(fang)(fang)法(fa)測(ce)定(ding)(ding)低(di)(di)限(xian)(xian)(xian)進(jin)(jin)行(xing)(xing)三(san)水(shui)(shui)平(ping)試(shi)(shi)驗(yan)(yan);對已制定(ding)(ding)最高(gao)殘(can)留限(xian)(xian)(xian)量(liang)MRL的(de)(de)(de)最大化學殘(can)留量(liang), 回(hui)(hui)(hui)(hui)收(shou)率(lv)應(ying)在方(fang)(fang)法(fa)LOD、MRL、選一(yi)合適(shi)點進(jin)(jin)行(xing)(xing)三(san)水(shui)(shui)平(ping)試(shi)(shi)驗(yan)(yan);對于未制定(ding)(ding)MRL的(de)(de)(de), 回(hui)(hui)(hui)(hui)收(shou)率(lv)應(ying)在方(fang)(fang)法(fa)LOD、常見限(xian)(xian)(xian)量(liang)指(zhi)標、選一(yi)合適(shi)點進(jin)(jin)行(xing)(xing)三(san)水(shui)(shui)平(ping)試(shi)(shi)驗(yan)(yan)。每一(yi)水(shui)(shui)平(ping)做雙平(ping)行(xing)(xing)。可參考(kao)表1給(gei)出的(de)(de)(de)數據進(jin)(jin)行(xing)(xing)回(hui)(hui)(hui)(hui)收(shou)率(lv)結(jie)(jie)果的(de)(de)(de)評價。
表1.回收率可接受范圍
3 方法的精(jing)密度(du)
方法的(de)(de)(de)精(jing)(jing)(jing)密(mi)(mi)度代表(biao)(biao)了測(ce)(ce)(ce)試人員操作檢測(ce)(ce)(ce)過(guo)程所獲得測(ce)(ce)(ce)試結果的(de)(de)(de)穩(wen)定水(shui)平(ping)(ping)。在進(jin)行(xing)方法的(de)(de)(de)精(jing)(jing)(jing)密(mi)(mi)度驗證試驗時(shi), 對(dui)于(yu)禁(jin)用物質, 精(jing)(jing)(jing)密(mi)(mi)度試驗應在LOD、兩(liang)倍(bei)LOD和十倍(bei)LOD三(san)個(ge)水(shui)平(ping)(ping)進(jin)行(xing);對(dui)于(yu)已制(zhi)定MRL的(de)(de)(de), 精(jing)(jing)(jing)密(mi)(mi)度試驗應在LOD、MRL、選一(yi)(yi)合適點三(san)個(ge)水(shui)平(ping)(ping)進(jin)行(xing);對(dui)于(yu)未制(zhi)定MRL的(de)(de)(de), 精(jing)(jing)(jing)密(mi)(mi)度試驗應在LOD、常見(jian)限量指標、選一(yi)(yi)合適點三(san)個(ge)水(shui)平(ping)(ping)進(jin)行(xing)。每一(yi)(yi)濃度水(shui)平(ping)(ping)的(de)(de)(de)重復測(ce)(ce)(ce)定次數(shu)>6。精(jing)(jing)(jing)密(mi)(mi)度測(ce)(ce)(ce)試的(de)(de)(de)結果可通(tong)過(guo)實(shi)驗室(shi)內的(de)(de)(de)變異系數(shu) (CV=標準偏(pian)差/平(ping)(ping)均值) 來(lai)表(biao)(biao)達, 標準偏(pian)差s可通(tong)過(guo)貝(bei)塞爾Bessel公式計算得到, 并(bing)可參考表(biao)(biao)2給出(chu)的(de)(de)(de)數(shu)據進(jin)行(xing)精(jing)(jing)(jing)密(mi)(mi)度結果的(de)(de)(de)評(ping)價。
表2.實驗室內變異系數
4 方法的準確度
方法(fa)(fa)的(de)(de)準確(que)(que)度又可稱為方法(fa)(fa)的(de)(de)正確(que)(que)度, 指(zhi)的(de)(de)是重復分析(xi)標(biao)準物質(zhi) (實物標(biao)樣) 或水(shui)平測試樣品, 測定的(de)(de)含量(liang)經回收率校(xiao)正后, 得出測定值與真值的(de)(de)偏差范圍。可參考表3給出的(de)(de)數據進行準確(que)(que)度結果的(de)(de)評價(jia)。
表3.實驗室內變異系數
5 方(fang)法的特(te)異(yi)性
實驗室(shi)在使(shi)用(yong)非標(biao)方(fang)(fang)法(fa)、實驗室(shi)設(she)計 (制(zhi)定) 的(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)、超出其預(yu)定范圍使(shi)用(yong)的(de)(de)(de)(de)(de)標(biao)準(zhun)方(fang)(fang)法(fa)、擴充和修改過的(de)(de)(de)(de)(de)標(biao)準(zhun)方(fang)(fang)法(fa)時, 有必(bi)要(yao)(yao)對(dui)使(shi)用(yong)方(fang)(fang)法(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)特(te)(te)異(yi)性(xing)進行確(que)(que)認(ren), 因為(wei)僅僅基于(yu)色譜(pu)分(fen)析的(de)(de)(de)(de)(de)技(ji)術手(shou)段(duan)不能準(zhun)確(que)(que)地區分(fen)同(tong)一分(fen)子(zi)量的(de)(de)(de)(de)(de)物質 (同(tong)分(fen)異(yi)構(gou)體) 。對(dui)于(yu)能夠準(zhun)確(que)(que)定量檢測(ce)的(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)要(yao)(yao)保證檢測(ce)的(de)(de)(de)(de)(de)結(jie)(jie)果準(zhun)確(que)(que)性(xing), 避免異(yi)構(gou)體結(jie)(jie)果的(de)(de)(de)(de)(de)誤判, 因此就(jiu)應該(gai)根(gen)據(ju)待測(ce)物的(de)(de)(de)(de)(de)化學結(jie)(jie)構(gou)信息、使(shi)用(yong)分(fen)子(zi)光譜(pu)等(deng)技(ji)術才能滿足(zu)方(fang)(fang)法(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)特(te)(te)異(yi)性(xing)。方(fang)(fang)法(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)特(te)(te)異(yi)性(xing)確(que)(que)認(ren)可(ke)采用(yong)如下的(de)(de)(de)(de)(de)技(ji)術手(shou)段(duan):
1) 氣(qi)相(xiang)色譜(pu)分析(xi)結果再用氣(qi)相(xiang)色譜(pu)質譜(pu)分析(xi)技(ji)術確證;
2) 液相(xiang)色譜(pu)(pu)分析(xi)結(jie)果(guo)再(zai)用(yong)液相(xiang)色譜(pu)(pu)質譜(pu)(pu)分析(xi)技術確證;
3) 免疫親和色譜分析結(jie)果再用氣相色譜質譜分析技術確證;
4) 氣相色譜分(fen)析結(jie)果再用紅外光譜分(fen)析技術(shu)確證;
5) 液相色(se)譜分析結果再(zai)用免疫層析分析技術確證。
6 方法的抗干擾(rao)性(xing)和(he)耐用性(xing)
實驗室采用的(de)(de)非(fei)標方法(fa)應(ying)具(ju)(ju)(ju)有對測(ce)(ce)試(shi)過(guo)程(cheng)中可(ke)影(ying)響(xiang)測(ce)(ce)試(shi)結果(guo)因(yin)素的(de)(de)抗干(gan)擾能(neng)力, 當測(ce)(ce)試(shi)條件發(fa)生細小變動時, 方法(fa)可(ke)具(ju)(ju)(ju)有一定的(de)(de)保持測(ce)(ce)試(shi)結果(guo)不(bu)受影(ying)響(xiang)的(de)(de)耐受程(cheng)度, 方法(fa)的(de)(de)技術條件應(ying)滿足最大的(de)(de)波動影(ying)響(xiang), 并且(qie)設備、試(shi)劑(ji)、操作過(guo)程(cheng)等應(ying)具(ju)(ju)(ju)有盡可(ke)能(neng)廣(guang)泛的(de)(de)適用性和(he)耐用性, 不(bu)宜具(ju)(ju)(ju)有嚴苛(ke)的(de)(de)要求。
實(shi)驗(yan)室只有做(zuo)好(hao)方(fang)法(fa)驗(yan)證和方(fang)法(fa)確(que)認(ren), 才能(neng)用(yong)測試(shi)數(shu)據(ju)真實(shi)地證明實(shi)驗(yan)室使用(yong)標(biao)準方(fang)法(fa)的操作能(neng)力(li), 證明所(suo)使用(yong)的非標(biao)方(fang)法(fa)具(ju)有的科學性(xing)(xing)、適用(yong)性(xing)(xing)、準確(que)性(xing)(xing)和有效性(xing)(xing), 達到(dao)確(que)保實(shi)驗(yan)室檢測結(jie)果準確(que)無誤的目的。
