常見實驗空白試驗總結
2018-08-06
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國(guo)標(biao)中空白試驗的定義(yi)
空白(bai)試驗：除(chu)不加(jia)試樣(yang)外(wai)，采用(yong)完全相(xiang)同的(de)分析步驟、試劑和用(yong)量(liang)(滴定法中(zhong)標準(zhun)滴定液的(de)用(yong)量(liang)除(chu)外(wai))，進行平行操作所得(de)的(de)結果。用(yong)于扣除(chu)試樣(yang)中(zhong)試劑本底和計算(suan)方法的(de)檢出(chu)限。
空白做不(bu)好會(hui)怎(zen)樣?
空白(bai)試(shi)驗測得的結(jie)果(guo)稱為空白(bai)試(shi)驗值。在進行樣品分(fen)析時(shi)所得的值減去空白(bai)試(shi)驗值得到的才是(shi)最終(zhong)分(fen)析結(jie)果(guo)。
空白試驗(yan)是實驗(yan)室(shi)質量控制的(de)重要環節(jie)，其準(zhun)確性對提高檢測結果的(de)準(zhun)確度至關重要。
空白試(shi)驗值反應了測試(shi)儀器的(de)噪聲、試(shi)劑中的(de)雜質、環境及操作過程(cheng)中的(de)沾污等因素對樣品測定(ding)產生的(de)綜(zong)合影響，直(zhi)接關系到(dao)測定(ding)的(de)最終結果(guo)的(de)準確性。
空白(bai)試(shi)(shi)驗(yan)值(zhi)(zhi)低(di)，數據離散程度小，分析結果的精度隨之提高(gao)，它表明分析方法和分析操作者的測(ce)試(shi)(shi)水(shui)平(ping)較高(gao)。當(dang)空白(bai)試(shi)(shi)驗(yan)值(zhi)(zhi)偏高(gao)時(shi)，應全(quan)面(mian)檢(jian)查試(shi)(shi)驗(yan)用水(shui)、試(shi)(shi)劑(ji)、量器和容(rong)器的沾污情況、測(ce)量儀器的性能及試(shi)(shi)驗(yan)環境的狀(zhuang)態等，以(yi)便盡(jin)可能地(di)降(jiang)低(di)空白(bai)試(shi)(shi)驗(yan)值(zhi)(zhi)。
做酸堿滴定時(shi)為什么要做空(kong)白試驗?
因為(wei)用(yong)作(zuo)稀釋液(ye)(ye)的(de)空(kong)白(bai)溶(rong)液(ye)(ye)有一定的(de)酸堿度(du)(du)，會(hui)影響滴(di)定結果，所以(yi)要(yao)做(zuo)空(kong)白(bai)試驗(yan)，來扣除空(kong)白(bai)的(de)干擾。比如空(kong)白(bai)溶(rong)液(ye)(ye)為(wei)酸性，這時候用(yong)堿滴(di)定此溶(rong)液(ye)(ye)，得(de)(de)到的(de)結果會(hui)偏高，要(yao)扣除空(kong)白(bai)溶(rong)液(ye)(ye)的(de)酸度(du)(du)，得(de)(de)到的(de)酸度(du)(du)才正確。
石(shi)墨爐測鉛(qian)時,空白(4硝酸+1高(gao)(gao)氯酸GR)值總是較高(gao)(gao),與灰化法的結果(guo)不大(da)一(yi)致(樣品為植(zhi)物樣)。
【分析(xi)】1. 所用(yong)的水(shui)為(wei)用(yong)石英亞沸水(shui)蒸餾器蒸餾得到的，先打一(yi)(yi)下空白，一(yi)(yi)般不會超(chao)過(guo)0.0015，然后采用(yong)的為(wei)硝酸(工(gong)藝(yi)超(chao)純)和高氯酸(優極純)消化(hua)，最后溶(rong)解用(yong)的1摩爾每升的鹽酸或(huo)硝酸(結果(guo)差不多，只是鹽酸穩定(ding)性要好一(yi)(yi)點)，定(ding)容體(ti)(ti)積為(wei)50mL的話空白值一(yi)(yi)般為(wei)0.03左右。不過(guo)鉛(qian)比較難(nan)做，基體(ti)(ti)干擾(rao)很(hen)大。
2. 空白問題來自(zi)多方面，上面說的水與(yu)試劑(ji)外，你用(yong)的氬(ya)氣(qi)是高純(chun)(chun)的嗎?也可用(yong)高純(chun)(chun)氮氣(qi)，但要注意分(fen)子帶背景
3. 可能(neng)來自由你(ni)所用的(de)硝酸和高氯酸不純(chun)所致。你(ni)可以先測(ce)空管，然后測(ce)你(ni)所用的(de)水(shui)，再測(ce)含酸的(de)水(shui)空白(bai)看(kan)看(kan)就(jiu)知道了
4.有可(ke)能是試液的(de)酸度過大會影響(xiang)測定，特別是使用高氯酸，影響(xiang)更(geng)大，酸度大對(dui)石(shi)墨爐損害也比(bi)(bi)較大。對(dui)于石(shi)墨爐測定鉛，濕法消化(hua)最好使用微波消化(hua)，使用硝酸和雙氧水，這樣空(kong)白中(zhong)酸度比(bi)(bi)較容易控(kong)制，空(kong)白也比(bi)(bi)較低(di)。
5. a.實際Pb含量(liang)有(you)出(chu)入，廠家就沒有(you)測準;b.儀器可能沒有(you)調制最(zui)佳。
7.石(shi)(shi)(shi)墨爐測(ce)鉛使用高(gao)氯(lv)(lv)(lv)酸(suan)(suan)加+硝酸(suan)(suan)消(xiao)解(jie)的樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)空白(bai)不(bu)(bu)穩定(ding)而且很高(gao)這(zhe)(zhe)(zhe)個問題沒有分析(xi)到點子上(shang)。這(zhe)(zhe)(zhe)個故(gu)障的實際問題不(bu)(bu)是試劑不(bu)(bu)純引起的，是因為(wei)在(zai)消(xiao)解(jie)時無(wu)論如何趕(gan)酸(suan)(suan)都很難完全把高(gao)氯(lv)(lv)(lv)酸(suan)(suan)除(chu)去(qu)，因為(wei)高(gao)氯(lv)(lv)(lv)酸(suan)(suan)是高(gao)沸點酸(suan)(suan)。這(zhe)(zhe)(zhe)樣(yang)在(zai)最后(hou)分析(xi)樣(yang)品(pin)時殘留的酸(suan)(suan)就是高(gao)氯(lv)(lv)(lv)酸(suan)(suan)。高(gao)氯(lv)(lv)(lv)酸(suan)(suan)會在(zai)石(shi)(shi)(shi)墨爐升溫灰化階(jie)段(duan)分解(jie)出氧(yang)氣和氯(lv)(lv)(lv)化氫。一方面氯(lv)(lv)(lv)離子會在(zai)最后(hou)原(yuan)(yuan)子化階(jie)段(duan)產(chan)生(sheng)非特(te)征(zheng)吸(xi)收，另一方面氧(yang)氣會和石(shi)(shi)(shi)墨管中的石(shi)(shi)(shi)墨反應燒蝕(shi)石(shi)(shi)(shi)墨管。所以石(shi)(shi)(shi)墨管測(ce)定(ding)含高(gao)氯(lv)(lv)(lv)酸(suan)(suan)的樣(yang)品(pin)損壞速度特(te)別快。相對來說高(gao)密石(shi)(shi)(shi)墨管壞的比涂層管和平臺(tai)管都快的多，基(ji)本用不(bu)(bu)過20次(ci)就斷了。這(zhe)(zhe)(zhe)可能是造成實驗(yan)不(bu)(bu)穩定(ding)的真實原(yuan)(yuan)因。
原子熒(ying)光空白偏(pian)高原因(yin)
1.測(ce)定介質的(de)選(xuan)擇及濃度的(de)影響
選(xuan)擇(ze)HNO3、HCl、HClO4、H3PO4和(he)H2SO4等(deng)進行了實驗，結果表明:以(yi)HClO4和(he)H3PO4作(zuo)介質響應值較(jiao)低，汞在(zai)H2SO4溶液中(zhong)能得到(dao)較(jiao)大靈敏度，但空(kong)白值也(ye)高。汞在(zai)HNO3和(he)HCl溶液中(zhong)的(de)熒光(guang)強度差別不大。在(zai)5%一25%的(de)硝酸(suan)和(he)5%一20%的(de)鹽酸(suan)中(zhong)熒光(guang)強度基本穩(wen)定。
2.酸的影響
作為原(yuan)子(zi)(zi)熒光的載流和標準(zhun)試(shi)劑的基體，酸對原(yuan)子(zi)(zi)熒光的影響十分的突(tu)出。一(yi)般在原(yuan)子(zi)(zi)熒光中(zhong)使用(yong)的酸主(zhu)要有兩種-鹽(yan)酸和硝酸。我(wo)們習慣上使用(yong)鹽(yan)酸。如果購買(mai)市場上質量差的酸，對空白的影響要大得(de)多(duo)。
3.還原劑(ji)的(de)影響
作為原(yuan)子(zi)(zi)熒光的還原(yuan)劑，一般使用最多的是硼(peng)(peng)氫(qing)化鉀(jia)(jia)或硼(peng)(peng)氫(qing)化鈉(na)，在原(yuan)子(zi)(zi)熒光法中(zhong)，還原(yuan)劑對樣(yang)品以及空(kong)白值的影響主要(yao)體現在它(ta)的用量。硼(peng)(peng)氫(qing)化鉀(jia)(jia)濃度(du)不(bu)宜超過3.0%。實驗表明，當硼(peng)(peng)氫(qing)化鈉(na)濃度(du)為1%時(shi)，靈(ling)敏度(du)和穩定性好，并且(qie)有效消除(chu)干擾(rao)。
4.燈電(dian)流的影(ying)響
一(yi)般來說燈電(dian)(dian)流與(yu)負高壓對(dui)原子熒光(guang)的(de)(de)影響是(shi)同方向(xiang)的(de)(de)。提高燈電(dian)(dian)流，空(kong)(kong)白值(zhi)(zhi)就相(xiang)應的(de)(de)提高。空(kong)(kong)白值(zhi)(zhi)太大的(de)(de)話，可(ke)以(yi)適當的(de)(de)降低電(dian)(dian)流值(zhi)(zhi)，使(shi)儀器(qi)的(de)(de)靈敏度降低，減少標準(zhun)空(kong)(kong)白的(de)(de)背景值(zhi)(zhi)，使(shi)所(suo)測的(de)(de)數據準(zhun)確、可(ke)靠，但(dan)是(shi)如果電(dian)(dian)流過小，靈敏度也將變小，對(dui)所(suo)測樣品的(de)(de)影響就會增加，所(suo)以(yi)選擇合適的(de)(de)燈電(dian)(dian)流，保證一(yi)定的(de)(de)空(kong)(kong)白值(zhi)(zhi)與(yu)靈敏度才是(shi)關鍵。
5.載氣(qi)的影響
實驗表明(ming)，當(dang)氬氣(qi)流(liu)速較(jiao)低時，測定(ding)(ding)的靈敏(min)(min)較(jiao)高.但結(jie)果的變動性(xing)加大(da)，實際測定(ding)(ding)取氬氣(qi)流(liu)速200ml/hifn，此時測定(ding)(ding)的靈敏(min)(min)度較(jiao)高，相對標準偏差(cha)可以接(jie)受(shou)。
空白(bai)色譜柱出峰，什么原因?
高效(xiao)液相色(se)譜，色(se)譜柱(zhu)是Kromasil C18(15cm*5Um)，流動相為(wei)10%乙腈(jing)和90%三氟乙酸水(shui)，走空白(bai)色(se)譜柱(zhu)時在整個保留時間(jian)的(de)(de)中(zhong)間(jian)位(wei)置出(chu)現較大的(de)(de)色(se)譜峰(feng)，走了好幾針空白(bai)，每針的(de)(de)響應(ying)都(dou)不同，有的(de)(de)很(hen)高，有的(de)(de)又(you)很(hen)低(di)，但雜峰(feng)一直(zhi)存在，不像是色(se)譜柱(zhu)里有雜質，用流動相沖(chong)洗后依然出(chu)現此問題，什么(me)原因(yin)?
【原因】
1、確定檢測(ce)波長(chang)，如果是末端吸收，排(pai)除三氟乙(yi)酸的干擾。
2、使用100%乙腈作為流動相(xiang)，乙腈作為樣(yang)品進(jin)樣(yang)，如果為基(ji)線，則說明色譜柱及(ji)系統完好。
3、然(ran)后在換流動相為10%乙腈和(he)90%三氟乙酸水，樣品為乙腈，如果有(you)上(shang)述“中間位置出現較大的色譜峰”，那說(shuo)明八成(cheng)問題在三氟乙酸上(shang)，或者稀釋(shi)三氟乙酸的水上(shang)。
4、如果上述2、3都有“中間(jian)位置出現較(jiao)大(da)的色譜峰”，檢查檢測器(qi)及進樣器(qi)。
5、這(zhe)些(xie)還不能(neng)解決，聯系儀器(qi)工程師
空白乙腈(jing)出峰(feng)，什么原因(yin)?
高效液相色(se)譜儀(yi)，進空白乙(yi)腈(jing)，在(zai)樣(yang)品峰(feng)位子出現倒峰(feng)，進雙蒸水(shui)在(zai)樣(yang)品峰(feng)出現正(zheng)峰(feng)，進樣(yang)品時有雜峰(feng)干擾(rao)，我(wo)已經排除了(le)(le)水(shui)和乙(yi)腈(jing)的問題(ti)，不知道是不是進樣(yang)池或者檢測器污染了(le)(le)，已經整了(le)(le)10多天，還是沒效果，請(qing)指教原(yuan)因和解(jie)決辦(ban)法。
【分析】
液相(xiang)中出現倒峰，主要(yao)原因是樣品吸(xi)(xi)收比(bi)流動相(xiang)吸(xi)(xi)收小，所(suo)以排除(chu)影響(xiang)(xiang)，不(bu)僅要(yao)考(kao)慮(lv)進(jin)(jin)樣系(xi)(xi)統(tong)污染和檢測池污染，還要(yao)考(kao)慮(lv)流動相(xiang)和色(se)譜柱(zhu)(zhu)的影響(xiang)(xiang)。換一根柱(zhu)(zhu)子試試，考(kao)察(cha)系(xi)(xi)統(tong)的情(qing)況(kuang)，如果照舊(jiu)，就排除(chu)色(se)譜柱(zhu)(zhu)的影響(xiang)(xiang)，然(ran)后(hou)更(geng)換流動相(xiang)試試，再(zai)以后(hou)清洗進(jin)(jin)樣系(xi)(xi)統(tong)和檢測池等(deng)等(deng)。
或(huo)將色譜(pu)(pu)柱從系統中斷開(kai)，直接用乙(yi)腈或(huo)水做流動相清洗檢測器就(jiu)可以(yi)知道是否(fou)是檢測器受(shou)污染，如(ru)果基線正常，再檢查你的進樣系統，樣品，前(qian)處(chu)理是否(fou)有(you)問題，如(ru)果都沒問題，就(jiu)去檢查色譜(pu)(pu)柱吧(ba)。
水質分析中氨氮的測(ce)定(ding)空白(bai)值很高的原因
實驗中納(na)氏試劑和酒石酸鉀鈉對(dui)空白值的高低影響很大(da)，可能原因(yin)如下：
1.測定使用(yong)的蒸餾水(shui)被污染，含(han)有影(ying)響實驗結果的雜(za)質，比如蒸餾水(shui)含(han)氨(an)。
2.試管、移液(ye)管等(deng)儀器沒有清洗徹底，這些因素對實驗結果(guo)也有較大的(de)影響。
3.實驗所用(yong)的(de)無氨(an)水(shui)質量(liang)不佳，含(han)氨(an)量(liang)比較高(gao)，導(dao)致(zhi)實驗得到的(de)空白值偏高(gao)，這(zhe)是最(zui)主要(yao)的(de)原因。
4.在配制(zhi)酒石酸鉀鈉(na)和鈉(na)氏試劑(ji)(ji)時出現較(jiao)大偏(pian)差(cha)，導(dao)致(zhi)(zhi)實驗(yan)所用(yong)的試劑(ji)(ji)純度(酒石酸鉀鈉(na)、鈉(na)氏試劑(ji)(ji))不(bu)佳，從而(er)導(dao)致(zhi)(zhi)實驗(yan)得到的空白值(zhi)偏(pian)高。
總氮空白值偏高，什么原因?
1、試劑的(de)配制
堿性過(guo)硫酸(suan)鉀(jia)(jia)的配(pei)制(zhi)過(guo)程十分(fen)重(zhong)要，掌握不好，會影響(xiang)消解效(xiao)果，對測定結(jie)果產生一定的影響(xiang)。配(pei)制(zhi)該溶液(ye)時(shi)，可分(fen)別稱取過(guo)硫酸(suan)鉀(jia)(jia)和氫(qing)(qing)氧(yang)化鈉，兩者分(fen)開配(pei)制(zhi)，再混合定容，或者先(xian)配(pei)制(zhi)氫(qing)(qing)氧(yang)化鈉溶液(ye)，待(dai)其(qi)溫度(du)(du)降到室溫后再加(jia)入(ru)過(guo)硫酸(suan)鉀(jia)(jia)溶解。若二者在一只燒(shao)杯中溶于水，應緩慢(man)加(jia)水，同時(shi)攪拌，防止(zhi)氫(qing)(qing)氧(yang)化鈉放熱使溶液(ye)溫度(du)(du)過(guo)高(gao)引(yin)起局部過(guo)硫酸(suan)鉀(jia)(jia)失效(xiao)。
2、玻璃(li)器皿的(de)洗滌
所使(shi)用(yong)的玻璃器(qi)皿(min)應先用(yong)(1+9)鹽酸浸泡后，再用(yong)無氨(an)水沖(chong)洗(xi)數次才(cai)能使(shi)用(yong)，否則，也會造(zao)成空白值偏高(gao)或平行性(xing)較差(cha)的情況。
3、比(bi)色時的注意事項
該(gai)項目的(de)測(ce)定涉及兩(liang)個波長(chang)(220nm和275nm)，建議在(zai)測(ce)定完一(yi)(yi)組樣品(pin)(pin)的(de)同(tong)一(yi)(yi)波長(chang)后，再調整到另一(yi)(yi)波長(chang)，統(tong)一(yi)(yi)測(ce)定，不(bu)要測(ce)完一(yi)(yi)個樣品(pin)(pin)的(de)兩(liang)個吸光度后再換(huan)另一(yi)(yi)個樣品(pin)(pin)，這樣反復(fu)調整波長(chang)會(hui)引(yin)起一(yi)(yi)定的(de)測(ce)量誤差。
4、試劑(ji)的選擇
堿性(xing)過(guo)(guo)(guo)硫酸(suan)鉀(jia)消解紫外分光光度法測定總氮的(de)(de)過(guo)(guo)(guo)程中(zhong)，過(guo)(guo)(guo)硫酸(suan)鉀(jia)是至關重(zhong)要的(de)(de)試(shi)劑(ji)(ji)。首先，試(shi)劑(ji)(ji)的(de)(de)純(chun)度關系到空白值(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)高低、測定結果的(de)(de)準(zhun)確度。一般普通分析純(chun)過(guo)(guo)(guo)硫酸(suan)鉀(jia)的(de)(de)總氮含量(liang)(liang)最高不超過(guo)(guo)(guo)0.005%，但由于試(shi)劑(ji)(ji)質量(liang)(liang)存在差異，有(you)些廠家、批次的(de)(de)試(shi)劑(ji)(ji)含氮量(liang)(liang)常常達(da)不到這個要求，致使(shi)空白值(zhi)(zhi)(zhi)偏高。因此，有(you)條件的(de)(de)話建議使(shi)用優級純(chun)試(shi)劑(ji)(ji)，盡量(liang)(liang)降(jiang)低試(shi)劑(ji)(ji)中(zhong)的(de)(de)含氮量(liang)(liang)，從而降(jiang)低實驗空白值(zhi)(zhi)(zhi)。
5、實(shi)驗(yan)用水(shui)及試(shi)劑的質量檢(jian)驗(yan)
若實驗的(de)空白值不夠理(li)想，則需要對實驗用水(shui)及試劑進行(xing)檢驗，以選擇出含氮量最(zui)低的(de)水(shui)和試劑，獲得理(li)想的(de)空白值。
粗蛋白(bai)測定空(kong)白(bai)偏高的影響(xiang)因素?
可以從以下(xia)方面考慮(lv)：
1.配溶液的水換沒換;
2.看看消化爐的回收(shou)率;
3.看看蒸餾儀的回收率;
4.鹽酸在不(bu)在保質期(qi)內;
5.配溶液的(de)硫酸是(shi)不是(shi)有問題;
小結(jie)
空(kong)(kong)白(bai)(bai)試驗(yan)(yan)是實驗(yan)(yan)室(shi)質量控制的(de)重要(yao)(yao)環節，其準確性(xing)對提高(gao)檢測結果的(de)準確度至關重要(yao)(yao)。以(yi)分光光度法(fa)空(kong)(kong)白(bai)(bai)為(wei)例 ，要(yao)(yao)用相(xiang)應的(de)實驗(yan)(yan)用純水或有(you)機溶濟作(zuo)參比(bi)，不能用空(kong)(kong)白(bai)(bai)實驗(yan)(yan)溶液做參比(bi)，以(yi)免人為(wei)減小空(kong)(kong)白(bai)(bai)值(zhi)，從而掩蓋空(kong)(kong)白(bai)(bai)實驗(yan)(yan)值(zhi)的(de)變異(yi) 。
值得注意(yi)的(de)是，通過計(ji)量(liang)認證的(de)實(shi)驗(yan)(yan)(yan)室(shi)，由于檢(jian)測儀器和玻璃量(liang)器定(ding)期檢(jian)定(ding) ，以(yi)及采取了全面的(de)質(zhi)量(liang)管理措(cuo)施，因此，若測定(ding)的(de)空白(bai)實(shi)驗(yan)(yan)(yan)值太大，一般(ban)是化學藥品純度不(bu)夠，配制的(de)試液變質(zhi)或(huo)被污(wu)染等原因 。應重新配制試液 ，返(fan)工重測該(gai)批(pi)樣(yang)品 ，直至空白(bai)實(shi)驗(yan)(yan)(yan)值合格(ge)。
