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分享|微生物檢測能力驗證注意事項有哪些?

2023-11-21 作者: 瀏覽數(shu):756

實(shi)(shi)驗(yan)室能(neng)力驗(yan)證和(he)室間比(bi)對活動(dong)是判定實(shi)(shi)驗(yan)室檢測能(neng)力的(de)重要(yao)手段(duan)之一,不但可以提高實(shi)(shi)驗(yan)室的(de)檢測能(neng)力和(he)技術(shu)水(shui)平,發現(xian)實(shi)(shi)驗(yan)室操作技術(shu)和(he)質量(liang)管理上存在的(de)問(wen)題(ti),還能(neng)增加客戶(hu)以及相關方(fang)對實(shi)(shi)驗(yan)室的(de)信任。

今天我們一起來看看微生物能(neng)力驗證注意(yi)事項有哪些?

01

能力驗證樣品接收及準備

1、操作前(qian)仔細閱讀參(can)指(zhi)導書(shu),關鍵(jian)是小的備注(zhu)要注(zhu)意,很多特(te)殊情況的處理大都在(zai)備注(zhu)里。

2、樣(yang)品(pin)(pin)接收前的(de)檢查很(hen)重(zhong)要(yao)(yao),首先(xian)對樣(yang)品(pin)(pin)的(de)完整(zheng)性(xing)進行(xing)檢查,對信息的(de)閱讀要(yao)(yao)全(quan)面,如(ru)果(guo)發(fa)現樣(yang)品(pin)(pin)有問題及時(shi)溝通,這樣(yang)要(yao)(yao)比做樣(yang)品(pin)(pin)的(de)時(shi)候在發(fa)現來的(de)要(yao)(yao)及時(shi),能節省不少的(de)時(shi)間(jian);

3、作業指導書的閱讀(du)要到(dao)位,很多(duo)能力驗(yan)證(zheng)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)寄(ji)(ji)到(dao)后要跟一(yi)份作業指導書,作業指導書中往往會(hui)對(dui)本(ben)次能力驗(yan)證(zheng)的樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)、成分、尺寸、選擇方法、樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)的結果(guo)記錄、包括修約或樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)的粘貼(tie)、樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)寄(ji)(ji)發的注(zhu)意事項等有(you)明確的規定,熟(shu)讀(du)這些對(dui)試(shi)(shi)驗(yan)準備有(you)很好的作用。比如有(you)的會(hui)要求將試(shi)(shi)驗(yan)后樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)一(yi)塊寄(ji)(ji)發組織單位,有(you)的實(shi)驗(yan)室(shi)如果(guo)不仔(zi)細(xi)閱讀(du)的話很容易將測試(shi)(shi)后樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)立(li)即處(chu)理掉,如果(guo)寄(ji)(ji)樣(yang)(yang)(yang)時在看見可就完了。

4、測試(shi)(shi)前(qian)的(de)(de)準(zhun)備工(gong)作一(yi)定要(yao)做好(hao),包括設備的(de)(de)校準(zhun)、試(shi)(shi)運(yun)行(xing)等,有條件的(de)(de)情況(kuang)下可以在正(zheng)式測試(shi)(shi)前(qian)選(xuan)擇一(yi)塊相仿的(de)(de)樣品進行(xing)一(yi)下預測試(shi)(shi),這(zhe)樣會將測試(shi)(shi)過程中的(de)(de)問題(ti)提前(qian)發現提前(qian)解決。對正(zheng)式測試(shi)(shi)的(de)(de)操作有幫助。


02

能力驗證樣品預處理

1、樣(yang)品測試過程(cheng)中的(de)判斷(duan)能(neng)力很重要,有時(shi)候我們(men)在測試中往(wang)往(wang)會自以為是,為了(le)保(bao)證測試過程(cheng)中的(de)準確操(cao)作(zuo)最好(hao)是找一個經驗豐富的(de)作(zuo)督察,發現問題及時(shi)解(jie)決,如果等(deng)操(cao)作(zuo)完畢再發現問題的(de)話可能(neng)會因為樣(yang)品的(de)消耗而無(wu)法驗證結果;

2、定量項目,西(xi)林瓶(ping)內樣品(pin)不可分割,應全部用(yong)于檢測。一般參考書指導的是加(jia)40mL稀釋液制成40mL樣品(pin)。

3、定量項目樣品稀(xi)(xi)釋(shi)。指導書標明(ming)了稀(xi)(xi)釋(shi)范圍的(de),在稀(xi)(xi)釋(shi)范圍左右各加(jia)1個稀(xi)(xi)釋(shi)度進行;書上沒有稀(xi)(xi)釋(shi)范圍的(de),多做(zuo)稀(xi)(xi)釋(shi)倍數,選擇合適的(de)稀(xi)(xi)釋(shi)倍數計數(一般可稀(xi)(xi)釋(shi)至10-8)。

4、定量(liang)項目,除(chu)了要(yao)多做稀(xi)(xi)釋(shi)倍(bei)數外,同時同一(yi)稀(xi)(xi)釋(shi)度要(yao)多倒幾(ji)皿,從(cong)原理上來講(jiang),檢(jian)測(ce)過程(cheng)屬于隨機抽樣檢(jian)查(cha),平板(ban)越(yue)(yue)多,數據越(yue)(yue)接近(jin)真值。考慮(lv)性(xing)價比,又不可能一(yi)直瘋狂一(yi)個稀(xi)(xi)釋(shi)度很(hen)多平板(ban),所以能力驗證時候多倒幾(ji)皿,求好結果。

5、定性項(xiang)目有一(yi)些重要步驟:

a、增(zeng)菌及分離步驟(zou)尤(you)其重要(yao)。選擇(ze)(ze)合適的增(zeng)菌液和分離用(yong)(yong)培(pei)養(yang)基(ji)對(dui)(dui)目標菌的檢(jian)出(chu)非常關鍵,選擇(ze)(ze)兩種以(yi)上的增(zeng)菌液和分離用(yong)(yong)培(pei)養(yang)基(ji)對(dui)(dui)菌株作(zuo)直接(jie)分離和增(zeng)菌后(hou)分離。

b、劃線(xian)分離十分重要,要把增菌液中的目標(biao)(biao)菌盡量(liang)多的表達出(chu)來,要分出(chu)單(dan)個菌落(luo)并盡可能多挑(tiao)取可疑菌落(luo),確保分離到目標(biao)(biao)菌。

c、生(sheng)化試驗和血清(qing)學試驗以營養(yang)瓊脂平板上的純培養(yang)細菌為好。


03

實驗(yan)過(guo)程一定要做陰(yin)性和(he)陽性對照(zhao)

陽性(xing)(xing)對(dui)照(zhao),是(shi)(shi)(shi)在試驗(yan)中(zhong)(zhong),檢驗(yan)培(pei)養(yang)基(ji)和(he)培(pei)養(yang)條件是(shi)(shi)(shi)否適合,如(ru)果在實(shi)驗(yan)中(zhong)(zhong),陽性(xing)(xing)實(shi)驗(yan)沒(mei)有生(sheng)長的話,那這個實(shi)驗(yan)是(shi)(shi)(shi)失敗的。陰性(xing)(xing)對(dui)照(zhao)主要是(shi)(shi)(shi)檢測培(pei)養(yang)基(ji)是(shi)(shi)(shi)否污(wu)染,在沒(mei)有加入任何(he)東西(xi)培(pei)養(yang)時,培(pei)養(yang)基(ji)培(pei)養(yang)后還是(shi)(shi)(shi)會顯示陽性(xing)(xing)結果,這就說明培(pei)養(yang)基(ji)滅菌(jun)不徹底,染菌(jun)了(le),這樣也會影響實(shi)驗(yan)結果的。


04

培養(yang)基(ji)方(fang)面需要注意地方(fang)

1、培(pei)養(yang)基配制(zhi)充分(fen)混勻后(hou)再滅菌

正確做(zuo)法是(shi)用一部分水攪拌均勻后,再加入剩余水量,混勻后滅菌(jun)或分裝。

一定要(yao)用震(zhen)(zhen)蕩器充分混(hun)勻(yun)水化液(ye),作為檢測原液(ye),普通手搖混(hun)勻(yun)與(yu)經(jing)震(zhen)(zhen)蕩器混(hun)勻(yun)的樣(yang)品液(ye),計數結(jie)果相差較大。混(hun)勻(yun)后的樣(yang)品嚴格按(an)照(zhao)指導(dao)書規定的時間進行檢驗。

2、混菌(jun)法(fa)倒皿要充分混勻

培養基倒完要左5圈(quan)右(you)5圈(quan)(混勻速度一定(ding)要慢,目(mu)的(de)是——避免(mian)培養基波動到二(er)皿接(jie)觸的(de)縫隙部分(fen)造成后續(xu)污染),找較水平位置冷卻凝固。

3、培養基要不要覆蓋問(wen)題(ti)

覆(fu)(fu)蓋(gai)的(de)目(mu)的(de)是為了(le)阻止活(huo)菌在培(pei)養基表層通過鞭毛移(yi)動,造成片狀生長,無法計(ji)數這(zhe)一不利現象的(de)發(fa)生。這(zhe)里可以發(fa)揮主觀能動性-對于不運動的(de)菌,可以不覆(fu)(fu)蓋(gai),對于運動的(de)菌覆(fu)(fu)蓋(gai)。


05

結果判斷

結果(guo)的(de)(de)判定(ding)(ding)一般(ban)根據設備操作(zuo),但是對(dui)于人為操作(zuo)如評級、手(shou)工操作(zuo)等(deng)結果(guo)可能會(hui)因為人員的(de)(de)差別而會(hui)有不同的(de)(de)偏差,這(zhe)樣在判定(ding)(ding)時(shi)最好是找有經驗(yan)的(de)(de)部門負責人或質(zhi)量專(zhuan)家(jia)一塊(kuai)定(ding)(ding)奪,這(zhe)樣的(de)(de)話會(hui)減少(shao)很多不必要的(de)(de)錯誤(wu)。


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