分享|《方法確認(rèn)作業(yè)指導(dǎo)書》, 可直接參考使用

方法確認(rèn)作業(yè)指導(dǎo)書

1 目的   

對(duì)實(shí)驗(yàn)室選用的各種方法進(jìn)行確認(rèn)，以證實(shí)實(shí)驗(yàn)室能夠正確運(yùn)用這些方法，并能證實(shí)該方法適用于預(yù)期的用途，在誤差的允許范圍之內(nèi)，可在本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)運(yùn)行。

2 范圍   

適用于實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)的標(biāo)準(zhǔn)方法或?qū)Ψ菢?biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)（制定）的方法、超出其預(yù)定范圍使用的標(biāo)準(zhǔn)方法、擴(kuò)充和修改過的標(biāo)準(zhǔn)方法；也適用于對(duì)新方法/新技術(shù)研究而建立新方法。

3 職責(zé)   

3.1 技術(shù)負(fù)責(zé)人指定專人負(fù)責(zé)方法的確認(rèn)，并對(duì)方法確認(rèn)的結(jié)果進(jìn)行核查批準(zhǔn)；

3.2 參加方法確認(rèn)的工程師應(yīng)詳細(xì)記錄試驗(yàn)現(xiàn)象及數(shù)據(jù)，總結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并編寫成文件；

3.3 相關(guān)人員嚴(yán)格按此作業(yè)指導(dǎo)書作業(yè)書。http://magnumcos.com/ 

4 名詞解釋   

4.1 檢出限
     方法檢出限是指某一方法在給定的置信水平上可以檢出被測(cè)物質(zhì)的最小濃度（相對(duì)檢出限）或最小質(zhì)量（絕對(duì)檢出限）。方法檢出限的確定方法有不 同，根據(jù)不同的檢測(cè)方法選擇合適的確定方法。

4.2 線性
     線性關(guān)系是指分析方法能夠得到與被測(cè)物質(zhì)的量或濃度具有直線關(guān)系的測(cè)定值的能力。

4.3 精密度
     精密度是指從均勻樣品中抽取的復(fù)數(shù)個(gè)待測(cè)樣品進(jìn)行重復(fù)分析測(cè)定時(shí)，所得到的一系列測(cè)定數(shù)據(jù)彼此之間的一致程度。測(cè)定值的誤差以偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差、或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式表示。

4.4 準(zhǔn)確度
     準(zhǔn)確度指分析方法所得測(cè)定值與真實(shí)值（標(biāo)準(zhǔn)值）相符合的程度，通常以測(cè)定重現(xiàn)精密度時(shí)所得總平均值與真值的差于真值的比值表示（真值一般使用理論值，如果理論值不存在或即使存在但很難求出的情況下，可采用經(jīng)過確證或認(rèn)可的數(shù)值來代替）。

4.5 分析結(jié)果的不確定度
     測(cè)量不確定度：表征合理地賦予被測(cè)量之值的分散性，與測(cè)量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)。
     在實(shí)際工作中，結(jié)果的不確定度可能有很多來源，例如定義不完整、取樣、基體效應(yīng)和干擾、環(huán)境條件、質(zhì)量和容器的不確定度、參考值、測(cè)量方法和程序中的估計(jì)和假定、以及隨機(jī)變化等。方法確認(rèn)時(shí)，應(yīng)努力嘗試找出影響不確定度的所有分量，并作出合量的評(píng)估，并應(yīng)確保報(bào)告結(jié)果的表達(dá)方式不會(huì)引起錯(cuò)覺。合理的評(píng)估應(yīng)建立在對(duì)方法實(shí)施知識(shí)以及測(cè)量范圍的基礎(chǔ)上，并利用過去的經(jīng)驗(yàn)。對(duì)各影響量產(chǎn)生的不確定度分量不應(yīng)有遺漏，也不能有重復(fù)。在評(píng)定測(cè)量不確定度時(shí)，對(duì)給定條件的所有重要不確定分量，均應(yīng)采用適當(dāng)?shù)姆治龇椒右钥紤]。

4.6 方法的靈敏度
     靈敏度可用儀器的響應(yīng)值或其它指示量與對(duì)應(yīng)的待測(cè)物質(zhì)的濃度或量之比來描述。一個(gè)方法的靈敏度可因試驗(yàn)條件的變化而變化。在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，靈敏度具有相對(duì)的穩(wěn)定性。http://magnumcos.com/ 

5 確認(rèn)內(nèi)容  

5.1  線性評(píng)價(jià)

5.1.1  準(zhǔn)備至少5個(gè)不同水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液，做標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)其回歸方程及線性相關(guān)系數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
5.1.2  標(biāo)準(zhǔn)曲線的最高點(diǎn)濃度不大于最低點(diǎn)濃度的50倍。
5.1.3  曲線的最低點(diǎn)最好和報(bào)告的檢出限相近。
5.1.4  GC等有機(jī)測(cè)試的相關(guān)系數(shù)應(yīng)該≥0.99，ICP等無機(jī)測(cè)試的相關(guān)系數(shù)應(yīng)該≥0.995

5.2   檢出限確認(rèn)

5.2.1  方法檢出限（MDL）
l重復(fù)測(cè)定試劑空白中的標(biāo)品至少7次，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)偏差s，乘以3可以得到MDL的估計(jì)值。
l選擇質(zhì)地均勻的樣品，并確保樣品無讀數(shù)，加入和MDL估計(jì)值濃度相近的標(biāo)品，重復(fù)試驗(yàn)至少7次，7次試驗(yàn)平均分布在三天內(nèi)完成。
l計(jì)算加標(biāo)試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)偏差，MDL=t（n-1）×s
其中 t值是指在99%置信區(qū)間，自由度為n-1時(shí)的t分布的系數(shù)，可查表得出

注：計(jì)算得到的MDL值應(yīng)該不超過10倍的加標(biāo)量，否則，應(yīng)該選擇更低的濃度值重復(fù)上述步驟。
     計(jì)算加標(biāo)樣的回收率和RSD值，回收率的范圍應(yīng)該在70~130%之間，RSD≤20%。
     回收率=標(biāo)品的實(shí)際值/加標(biāo)的理論值×100%

5.3  準(zhǔn)確度和精確度確認(rèn)

5.3.1  準(zhǔn)確度確認(rèn)

     用加標(biāo)回收率測(cè)定，在樣品中加入一定量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測(cè)定其回收率。

     至少測(cè)試7次加標(biāo)樣，且7次加標(biāo)樣應(yīng)該平均在三天做完。

    記錄測(cè)試結(jié)果并計(jì)算回收率，回收率范圍應(yīng)該在80~120%之間， RSD≤20%。

    對(duì)ICP等的元素分析的回收率范圍應(yīng)控制在90~110%。

5.3.2 精確度確認(rèn)

     試驗(yàn)應(yīng)盡量覆蓋方法提及的不同材質(zhì)樣品。

     試驗(yàn)加標(biāo)水平應(yīng)盡量覆蓋方法的測(cè)試范圍，要包括比MDL稍大的濃度點(diǎn)，線性的最高點(diǎn)。

     重復(fù)試驗(yàn)至少七次，RSD≤20%。http://magnumcos.com/ 

5.4  試驗(yàn)的不確定度確認(rèn)評(píng)估

5.4.1 規(guī)定被測(cè)量，該資料在相對(duì)應(yīng)的SOP中給出。

5.4.2 識(shí)別不確定度的來源

     考慮與整體方法性能的要素有關(guān)的不確定度，例如可觀察的精密度和相對(duì)于合   適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)所測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)偏差,這些 構(gòu)成了不確定評(píng)估中的主要分量。

     然后對(duì)其他可能的分量進(jìn)行評(píng)估，量化那些顯著的量。

5.4.3 不確定度分量的量化
     測(cè)量不確定度分為A類評(píng)定和B類評(píng)定：
     根據(jù)實(shí)際檢測(cè)數(shù)據(jù)對(duì)觀測(cè)列進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算重復(fù)測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)偏差，得出A類不確定度；

     根據(jù)有關(guān)技術(shù)資料和測(cè)量?jī)x器特性或者校準(zhǔn)證書等信息用不同于A類評(píng)定的方法評(píng)定B類不確定度；

5.4.4 計(jì)算合成不確定度
     根據(jù)有關(guān)規(guī)則對(duì)不確定度的分量進(jìn)行合成，得到合成不確定度,用合成不確定度乘上包含因子可以得到擴(kuò)展不確定度。

5.5  數(shù)據(jù)記錄
     試驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)詳細(xì)記錄試驗(yàn)的整個(gè)過程，包括樣品的制備方法、標(biāo)準(zhǔn)品的級(jí)別及試劑的調(diào)配、試驗(yàn)環(huán)境、分析測(cè)試參數(shù)、注意事項(xiàng)、分析結(jié)果等。
5.6 方法確認(rèn)報(bào)告的編寫
試驗(yàn)結(jié)束后，工程師應(yīng)編寫方法確認(rèn)報(bào)告，內(nèi)容至少應(yīng)包括如下信息：
   a)  范圍
   b)  被檢測(cè)物品類型的描述
   c)  需要確定的參數(shù)和量值
   d)  所需的裝置、設(shè)備及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
   e)  要求的環(huán)境條件
   f)  方法驗(yàn)證參數(shù)記錄，評(píng)定合格的判據(jù)和(或)要求。
   g)  需記錄的數(shù)據(jù)以及分析和表達(dá)的方法
   h)  不確定度或評(píng)定不確定度的程序及結(jié)果
   i)  程序的說明，包括：
       被測(cè)樣品的識(shí)別標(biāo)志、處置、運(yùn)輸、儲(chǔ)存和準(zhǔn)備
       檢測(cè)工作前的檢查
       檢查設(shè)備是否正常，必要時(shí)每次使用前的校準(zhǔn)或調(diào)整
       數(shù)據(jù)和結(jié)果的記錄方法
       需遵循的安全措施等

 5.7 方法確認(rèn)報(bào)告的審核
     方法確認(rèn)報(bào)告交給技術(shù)負(fù)責(zé)人等審核，經(jīng)批準(zhǔn)后方可在檢測(cè)室推行該檢測(cè)方法。