按國家實(shi)(shi)驗(yan)室認(ren)可(ke)的(de)(de)概(gai)念，是指(zhi)(zhi)一個能夠(gou)承擔(dan)法律責任的(de)(de)實(shi)(shi)體(ti)(ti)。這(zhe)里所指(zhi)(zhi)的(de)(de)是實(shi)(shi)驗(yan)室（微(wei)檢(jian)室）內建立的(de)(de)質量管理的(de)(de)保證體(ti)(ti)系(xi)。人員、房屋 設備滿足檢(jian)測工作需要。

1、人員要求

實(shi)驗室人(ren)(ren)員(yuan)的分類：管(guan)理人(ren)(ren)員(yuan)、技術人(ren)(ren)員(yuan)、技術支持(chi)人(ren)(ren)員(yuan)等(deng)。

相(xiang)應(ying)崗位(wei)的人員，應(ying)具備(bei)相(xiang)應(ying)的技術能力，相(xiang)應(ying)的技術能力證(zheng)(zheng)明（證(zheng)(zheng)書及證(zheng)(zheng)件(jian)）。

微生物檢驗室因有(you)相應技術能力的人負責室內的技術工作。并設立(li)質量監督員。

2、房屋條件要求

房屋要求：具有適宜、足夠寬敞、通風有良好的照明(ming)。

房屋內墻面及地等應(ying)采用易于(yu)清(qing)潔的材料(liao)，保(bao)持(chi)房間清(qing)潔。

房(fang)間的設置(zhi)，以(yi)其開展的工作內容加以(yi)分(fen)用，設立專用房(fang)間。

房間(jian)的大(da)小還應根據從事實驗人員的進入數量上加以(yi)考慮。

3、環(huan)境設施要求

專用房(fang)間的溫濕度控制與記錄（樣品存放室）

特殊環境的(de)微生(sheng)物指標控制與記錄(lu)（無菌室等）

專用工(gong)作室(shi)的標準(zhun)操作規程和定期的檢測校(xiao)準(zhun)程序。（潔凈室(shi)等(deng)）

特(te)殊環(huan)境中的專用設(she)施質量控制應符合有(you)關要求（凈化工作臺）

微生物檢驗常用需監控的設(she)備和儀(yi)器：

1、培(pei)養(yang)箱(xiang)（生化培(pei)養(yang)箱(xiang)或(huo)CO2培(pei)養(yang)箱(xiang)等）、干燥(zao)箱(xiang)、高壓滅菌鍋、凈化工作臺(tai)、pH計、 冰箱(xiang)，（低溫冰箱(xiang)或(huo)冷柜）溫度計、紫外(wai)燈、顯微鏡、離心機、天平、。

2、小(xiao)計(ji)量容(rong)器(qi)

3、微(wei)(wei)生物(wu)測定儀(yi)器、微(wei)(wei)生物(wu)檢定儀(yi)器、空氣采樣器、酶標儀(yi)專用等。

1、高壓滅菌鍋的溫度控(kong)制(zhi)

高壓(ya)滅菌鍋；生(sheng)物指示菌法（常用）、化學變色紙(zhi)片及高壓(ya)滅菌鍋溫(wen)度(du)計等方(fang)法進行檢測(ce)。

生物指示(shi)菌(jun)(jun)法(fa)是一種(zhong)高壓滅(mie)菌(jun)(jun)鍋(guo)的效(xiao)果顯示(shi)法(fa)。

高壓滅菌鍋由(you)專人按作業指導書(shu)操作，并做好每一(yi)次(ci)的(de)作業記錄。

高壓滅菌鍋使用時，內置物(wu)品不(bu)能太(tai)多(duo)，單位體積內的內容(rong)物(wu)（每瓶內的培(pei)養基）不(bu)能太(tai)多(duo)。同時應注意內容(rong)物(wu)不(bu)同耐受溫度(du)。總的暴露(lu)時間最好不(bu)要超過45min。

高(gao)壓(ya)滅(mie)菌鍋日常工作記錄應(ying)包含以下信(xin)息(xi)：高(gao)壓(ya)滅(mie)菌的材料、開始(shi)時(shi)間、壓(ya)力/溫度、取出時(shi)間、高(gao)壓(ya)滅(mie)菌膠帶的顏(yan)色變化（日常常用無(wu)菌培養代替）

高壓滅菌(jun)鍋溫度波(bo)動范圍(wei)：110，115和121±2℃。

高壓滅菌鍋校(xiao)準(zhun)周期一般(ban)在半年(nian)。

2、干(gan)燥滅菌箱溫度控(kong)制

干(gan)燥滅菌箱(xiang)日常工作記錄(lu)中應包括以下(xia)信息：開始的時(shi)間(jian)、到達滅菌溫度(du)時(shi)的時(shi)間(jian)、取出的時(shi)間(jian)（或關閉時(shi)間(jian)）。

干(gan)燥滅菌(jun)箱的溫(wen)(wen)度(du)校準；用參考(kao)溫(wen)(wen)度(du)計進(jin)行(xing)溫(wen)(wen)度(du)測試。

干(gan)燥(zao)滅菌箱溫度要求與精(jing)確度：160±5 ℃或(huo)180 ±5 ℃。前者為(wei)滅菌2h，后(hou)者為(wei)30min。

干燥(zao)滅菌箱校準時間一般為一年。

3、培養基配制用蒸(zheng)餾水的控制

對(dui)于蒸餾(liu)水器來說：按設備說明，定期(qi)清潔(jie)離(li)(li)子(zi)交換器和更換離(li)(li)子(zi)交換材料(liao)。

檢(jian)測要求：西歐標準為微(wei)生物檢(jian)驗用(yong)蒸餾水的(de)特定電導(dao)率＜0.5ms/m；細菌數＜50CFU/mL。我們日常用(yong)的(de)標準為 ＜10ms/m，未見有細菌指標。

檢測頻率：1次/每(mei)月。

蒸餾(liu)水定點供應，并做好相(xiang)應的(de)質量控制(zhi)，記(ji)錄檢測結果。

4、天平的管理

天平放置要求：無(wu)振動(dong)、無(wu)氣流影響及水平臺面(mian)上。

天平要(yao)有使用及(ji)運行(xing)檢查記錄。

天平作為計量儀器是(shi)列(lie)入國家(jia)強(qiang)制檢定(ding)的范圍，一般1次/年進行(xing)檢定(ding)。

運(yun)行檢(jian)查頻率按運(yun)行計劃或(huo)按產品(pin)（天平生產廠(chang)家）給出(chu)的標(biao)準重量單(dan)位進(jin)行對照

5、pH計(ji)

pH計使用前(qian)應用標(biao)準(zhun)液(ye)進行(xing)校(xiao)準(zhun)。

緩沖(chong)液使用(yong)有效期：pH4.00 約(yue)1年

pH7.00 約6個月

pH9.00 約6個月

電極(ji)敏感性(xing)檢(jian)測及極(ji)性(xing)恢(hui)復。

6、凈化工作(zuo)臺(tai)的控制

水平流凈化工作臺工作區(qu)域，要求(qiu)潔凈度為(wei)100級(ji)。空氣沉降30min，細(xi)菌(jun)數＜1個/皿(min)。垂直流凈化工作臺，細(xi)菌(jun)數＜0.49個/皿(min).

凈化工(gong)作臺運行(xing)檢查頻(pin)次：1次/月主要(yao)是細菌沉降檢測(ce)。

凈化工作臺高(gao)效過濾膜一(yi)(yi)般(ban)為一(yi)(yi)年(nian)更換一(yi)(yi)次，并同(tong)時進行粒子(zi)與細菌沉降檢測。 

7、紫外線(xian)燈的控制(zhi)

檢測(ce)方法：儀器(qi)測(ce)試法和生物測(ce)試法。前者(zhe)是通(tong)過專用儀器(qi)檢測(ce)紫外(wai)燈管發(fa)射的紫外(wai)光強度(du)。國家(jia)消毒(du)技術規范中(zhong)表明在距離(li)照射無1米處(chu)，要求其(qi)強度(du)為90。

生(sheng)物(wu)測試(shi)法：采(cai)用一定(ding)的菌培養物(wu)，經(jing)一定(ding)比例稀(xi)釋，菌量控制在(zai)200-250個/0.5mL，涂(tu)布平板在(zai)紫外燈(deng)光(guang)下照(zhao)射，2min，同時設(she)置(zhi)普通光(guang)源的對照(zhao)組，后(hou)置(zhi)37℃48h，計(ji)算(suan)其殺滅率。要求殺滅率達99%。

8、顯微(wei)鏡的控制(zhi)

顯微鏡應制定作業(ye)指導書，日常維(wei)護(hu)記(ji)錄(lu)及自(zi)校記(ji)錄(lu)。

顯(xian)微(wei)鏡應置于(yu)無振動，避免灰(hui)塵，防潮等要(yao)求的(de)環境。

9、其它(ta)微生物檢測專(zhuan)用儀(yi)器的控制

細菌鑒定儀、酶標(biao)儀等設備(bei)，工(gong)作中(zhong)常(chang)用陽性(xing)(xing)對照檢測其(qi)功能正(zheng)常(chang)性(xing)(xing)。

儀器的檢定(ding)則按有關的部門檢定(ding)或按自校(xiao)作業(ye)指導書進行(xing)。

儀器的使(shi)用登(deng)記、校準計(ji)劃、校準記錄等文件(jian)存檔。

儀器專人(ren)使用、操作者應取得(de)相應的(de)崗位(wei)培訓合(he)格，持證(zheng)上崗。

正(zheng)確進行培養基質量控制(zhi)，并作(zuo)為一項經常(chang)性(xing)的工作(zuo)，建立完整的檢驗(yan)資(zi)料，是實驗(yan)室今后(hou)通過相應級別(bie)的認證，在整個檢驗(yan)質量控制(zhi)體系中所必(bi)須(xu)具(ju)備的文件資(zi)料。

1、常用培養基的質量控制(zhi)

檢驗項目(mu)與方法：對新批號的干(gan)燥(zao)培(pei)養基物(wu)理、化學(xue)(xue)及生(sheng)物(wu)學(xue)(xue)指標鑒定(ding)

A：感官（外觀）研細程度(du)和顏色（溶解前后），透明度(du)，雜質等；

B：PH測定，按各種(zhong)培養基(ji)要(yao)求的PH±0.2，蒸餾水的PH應在6.4-7.0之間。

C：生物學指標檢(jian)定，被(bei)檢(jian)培養基相應(ying)細(xi)菌生長率測試(shi)；菌落(luo)大小及特征的檢(jian)測。

生長率測試：適用與液體和固體培(pei)養(yang)(yang)基(ji)：將菌培(pei)養(yang)(yang)液，用生理鹽水做倍比(bi)稀釋，取合(he)適稀釋度(du)進(jin)行平板計數或接種被檢的(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)試管，同(tong)時以(yi)按(an)相關(guan)的(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)國(guo)標配方新鮮配制的(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)進(jin)行對照(zhao)。不低與10%。

菌(jun)(jun)落大小測試：劃線分離測試菌(jun)(jun)，取(qu)10個菌(jun)(jun)落測量直徑大小，其直徑均(jun)值(zhi)與新鮮配制(zhi)的培養(yang)基無(wu)統計(ji)學差異(yi)。

2、常用培養基質量(liang)標準(zhun)

外觀(guan)和理化(hua)標準：

干粉顏色：淡(dan)黃(huang)色粉末或(huo)呈現本培養基特有的顏色

溶解后(hou)培養基色(se)澤(ze)：清晰透明（含(han)瓊脂除(chu)外）淡黃色(se)或特有的色(se)澤(ze)；

滅菌(jun)后(hou)的培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)PH：7.2±2℃為(wei)多；個別弧菌(jun)檢(jian)驗(yan)用培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)pH值偏(pian)高為(wei)：8.0 ±2℃

生物學(xue)指(zhi)標：菌落特征及菌落大小(xiao) 。

3、培養基保存環(huan)境(jing)

制成的(de)培(pei)(pei)養基保(bao)(bao)存(cun)環境為(wei)4℃冰箱(xiang)，如(ru)制成平板則用塑料袋包裝置冰箱(xiang)保(bao)(bao)存(cun)，干燥培(pei)(pei)養基干粉(fen)含有(you)活性物質、遇熱(re)易分(fen)解的(de)物質應仔細(xi)查看存(cun)放(fang)條件，多(duo)數也須(xu)放(fang)在(zai)2-8 ℃條件保(bao)(bao)存(cun)。

有的培養基則以存(cun)放于(yu)10-15 ℃條(tiao)件(jian)為易(yi)。如含有高濃度膽鹽的培養基。

4、培養(yang)基制備控(kong)制程序

培(pei)養(yang)基配制所用的儀(yi)器設備(bei)(bei)培(pei)養(yang)基配制所用的儀(yi)器設備(bei)(bei)必須(xu)經(jing)過(guo)相應的鑒定 。

配制培養基所用的用具及容器(qi)配制培養基所用的用具及容器(qi)必(bi)須是清(qing)潔(jie)或是滅菌的，一(yi)些特殊不易洗刷(shua)清(qing)潔(jie)的玻璃器(qi)皿，必(bi)要時可用重(zhong)鉻酸(suan)鉀硫酸(suan)清(qing)潔(jie)浸泡(pao)后，取出置5%氫(qing)氧化鈉(na)溶(rong)液(ye)浸泡(pao)數分鐘(zhong)，再(zai)用3%鹽(yan)酸(suan)溶(rong)液(ye)進行中和，然后用清(qing)水(shui)沖洗，烘干(gan)后備用。

5、培養基配制原料，試劑質量控制

配制好的培養基（尤其(qi)是糖發(fa)酵管(guan)）不宜久放。，因為培養培養基吸(xi)收空(kong)氣中的二(er)氧化(hua)碳(tan)，會使培養基變酸，從而影響細菌的生(sheng)長。

培(pei)養基中的抑(yi)制劑及指示劑一定要精確(que)稱量，抑(yi)制劑要注意合理(li)配(pei)伍。 

6、培(pei)養(yang)基主要(yao)原(yuan)料的質量控制

配制(zhi)培養(yang)基的主(zhu)要原料(liao)有(you)蛋(dan)白胨、牛(niu)肉(rou)浸(jin)膏(gao)、酵母浸(jin)膏(gao)、膽鹽(yan)、無機鹽(yan)和瓊脂(zhi)等，這些主(zhu)要原料(liao)的有(you)劣，直接影響到培養(yang)基的質量，由此也將(jiang)影響檢驗質量。

指標有感官、理化、物理、生物學。

定(ding)期使用有證標準物(wu)質和次級標準物(wu)質（參考物(wu)質）進行(xing)(xing)內部(bu)質量控制。實驗(yan)室(shi)間的(de)(de)比對(dui)(dui)或能(neng)力(li)驗(yan)證，利用相同(tong)(tong)或不同(tong)(tong)方法進行(xing)(xing)重復檢測，對(dui)(dui)留存的(de)(de)樣品進行(xing)(xing)在檢測。

1、菌落(luo)計(ji)數精密(mi)度控制(zhi)直(zhi)接計(ji)數

選擇同一(yi)標本，要求檢驗人員進行菌落計(ji)數。

將大(da)腸菌(jun)(jun)（25922）或經(jing)檢(jian)定標化的(de)菌(jun)(jun)片，通過(guo)合(he)適的(de)梯度稀釋，選擇合(he)適的(de)稀釋度進行(xing)菌(jun)(jun)落計(ji)數(shu)(shu)實驗操作。36±1℃培養24h進行(xing)菌(jun)(jun)落計(ji)數(shu)(shu)。

菌落(luo)計數精密(mi)度(du)控(kong)制重(zhong)復計數法

2、重復計數要求

自身(shen)同一平皿重復計數誤差(cha) 小于7.7%

實驗(yan)人員之間同一平皿重復計數誤差 ±18 .2%

自身同一梯度平行加樣兩皿間相對(dui)誤 小于7.7%

實驗人員之間同一梯度(du)計數誤差(cha)X±18 .2%范圍

不同梯度間菌落計(ji)數(shu)最終誤(wu)差 小于7.7%

3、菌種(zhong)鑒定質(zhi)控

菌種(zhong)鑒(jian)定質控要求，對所給的微(wei)生(sheng)物菌種(zhong)，按有(you)關的方(fang)法及指(zhi)標(biao)進行生(sheng)化、血清(qing)等方(fang)面的鑒(jian)定。

鑒(jian)定(ding)質量評價：鑒(jian)定(ding)程序是(shi)(shi)否正確(que)；鑒(jian)定(ding)方(fang)法是(shi)(shi)否正確(que)；具體操作技術是(shi)(shi)否熟(shu)練，結果報告是(shi)(shi)否正確(que)。每一項設立分(fen)值(zhi)為25分(fen)。總(zong)分(fen)為100分(fen)。

4、內部質量控制的推薦頻率

菌落(luo)計數精(jing)密度控制(zhi)：1次/3月(yue)；

菌(jun)種鑒定控制：1次/半(ban)年(nian)或1年(nian)

盲樣測定丟失的對照 1次/半年

1、培訓與告之

    實驗(yan)室管理人(ren)員及(ji)實驗(yan)人(ren)員必(bi)(bi)須(xu)了解相關(guan)工(gong)作(zuo)有關(guan)的(de)(de)危險。對招收(shou)新(xin)職(zhi)工(gong)、工(gong)作(zuo)開始發(fa)生變化或使(shi)用(yong)新(xin)方法，啟用(yong)新(xin)的(de)(de)設(she)備時，這點尤為(wei)重要。所(suo)有工(gong)作(zuo)人(ren)員，包括清潔和(he)服務人(ren)員都要知道。需要進(jin)行(xing)口頭和(he)書面兩種方式的(de)(de)通(tong)知。有關(guan)儀(yi)器(qi)必(bi)(bi)須(xu)要有字跡清楚其(qi)安全使(shi)用(yong)的(de)(de)書面說(shuo)明。

2、標志(zhi)

在進行致病性微(wei)生物工(gong)作的房間人口處必(bi)須要有(you)警示標(biao)志。

實驗室的(de)(de)(de)房間必(bi)須以(yi)使(shi)與微生物有關(guan)的(de)(de)(de)危險得(de)以(yi)過免的(de)(de)(de)方式裝(zhuang)置，以(yi)使(shi)微生物的(de)(de)(de)傳播得(de)到限制，房間還應便于清潔和消除污染．工作臺必(bi)須由光(guang)滑(hua)的(de)(de)(de)、耐消毒劑的(de)(de)(de)材料制成。難以(yi)清潔的(de)(de)(de)角落、彎(wan)頭及管道應盡可能地避免污染。 

3、防止空氣污染

加熱(re)培(pei)養(yang)蒙或其(qi)它化學物質(zhi)時，粉(fen)塵可(ke)(ke)擴做到空氣(qi)中．這(zhe)可(ke)(ke)給工作人(ren)員帶(dai)來過敏反應或出現其(qi)它問(wen)題(ti)．因此，設計(ji)排風裝置(zhi)很(hen)重(zhong)要，以至包括天平附(fu)近的抽風點。通常稱量應按正確的安全規程進(jin)行。 

4、有毒有害物防(fang)護

濃酸和堿及其(qi)它腐蝕性化學物(wu)質和毒性物(wu)質必須專門保存，盡可(ke)能鎖存，以使它們引起的損害減至最低．

對實驗室所用的所有(you)化學(xue)物質，實驗室必(bi)須有(you)記(ji)述其危險及操作中可能(neng)的限制(zhi)的產品表(biao)．

在所需的范圍內工(gong)作人員必(bi)須使用人體(ti)防護裝置，防護服、手套籌．使用安全設施是實驗人員的職責污(wu)染了的防護員應盡快地更換，離開工(gong)作室(shi)時(shi)，必(bi)須脫(tuo)去。

5、消除污染和廢物的處(chu)理

實驗室必須要有(you)關(guan)于應如(ru)何消除濺出(chu)的(de)(de)微生物(wu)污染的(de)(de)書面(mian)說明(ming)。另外，對廢物(wu)的(de)(de)處理，如(ru)用過的(de)(de)培(pei)養皿和打碎的(de)(de)玻璃器皿，應有(you)固定的(de)(de)程(cheng)序。所有(you)被洗(xi)的(de)(de)物(wu)品(pin)在洗(xi)刷(shua)前(qian)均經高壓滅菌(jun)，洗(xi)滌工受微生物(wu)感染的(de)(de)危(wei)險就可以盡可能避免(mian)。